医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:51

关键词： HLA配型；混合骨髓移植；外周血干细胞移植；急性移植物抗宿主病 中图分类号 R457.1^＋2 R55 R331．2^＋2 人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)是人类最强的同种抗原，是主要组织相容性抗原之一。近年来其结构和功能的研究，不仅给免疫学基础研究带来了突破性的进展，而且使器官移植成为一项有效的治疗手段。HLA抗原分为三类：Ⅰ类包括A，B，C等位点，Ⅱ类包括DR，DP，DQ等位点，Ⅲ类为免疫相关基因。其中Ⅰ、Ⅱ类抗原与器官移植排斥反应密切相关。目前，HLA配型已成为造血干细胞移植挑选供者时必须进行的实验项目，且分型方法已开始由血清学转向基因分型方法。现将1993～1999年笔者所做的用于造血干细胞移植的HLA-Ⅰ分型，HLA－Ⅱ类DNA分型及移植结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 造血干细胞移植供受者中受者为来本院就诊的淋巴瘤及各种恶性血液病患者51人，供者163人为以上患者同胞姊妹及父母。所有人员均为汉族。病人在缓解期，2周内无化疗，无输血者，且WBC＞2.0×10⁹／L。异体外周血干细胞移植(peripheral blood stem cell transplantation PBSCT)供者采用细胞因子动员后CS-3000分离单个核细胞，输入放化疗联合预处理后的受者。半相合混合骨髓移植(mixed bone marrow transplantation MBMT)供者采用细胞因子动员后采集骨髓，受者细胞因子联合化疗动员后采集骨髓，供受者骨髓输入联合预处理后受者的比例为1∶6。HLA-Ⅰ类血清反应板、补体购自美国莱姆德公司及上海输血研究所；倒置相差显微镜为日本Olympus公司产品；HLA-DR、DQ DNA分型试剂盒为美国G&T公司与中国医学科学院输血研究所联合开发产品。 1.2 HLA-Ⅰ分型 供受者各采血20ml，玻璃珠缠绕去纤维血，用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，调整淋巴细胞数为2×10⁶／ml。淋巴细胞加入HLA-Ⅰ反应板，作标准微量淋巴细胞毒试验^［1］。在倒置相差显微镜下读板，并确定抗原。 1.3 HLA-Ⅱ类DNA分型 按文献［2］进行。 2 结果与分析 2.1 HLA-Ⅰ分型结果 51个患者家庭共有214人参与分型，包括患者姊妹甚至父母，平均每个患者有3.2人与其配型。HLA-A，B位点与患者全相合者有28人，占54.9%，其中包括一个患者有两个相合供者及一个患者与其母亲的表型完全相合；而有2个以上位点相合者有129人，占253%，因此现在的成人患者中其姊妹或父母能提供HLA半相合，甚至全相合供者的机率是较大的，他们的家庭中姊妹多在两个以上，而独生子女将会遇到很大困难。 2.2 HLA-Ⅱ类DNA配型结果 HLA-Ⅰ类相合者中适合PBSCT者13人作HLA-Ⅱ类DNA分型。结果除1例为母子间配型肯定为半相合者外，其余12例HLA-Ⅰ，Ⅱ类配型结果均相合，这是因为HLA-Ⅰ，Ⅱ类位点在遗传是连锁的，也说明HLA-Ⅰ，Ⅱ类配型结果的正确性。 2.3 HLA-Ⅰ类配型后的MBMT和HLA-Ⅱ类DNA配型后的PBSCT结果见附表。 附表 HLA配型后移植效果(n=32)

	HLA半相合MBMT数 (n=19)	HLA-Ⅰ、Ⅱ相合PBSCT数 (n=13)
无病存活数	9	10
急性GVHD数	0	1
慢性GVHD数	10	6
移植相关死亡数	5	3
复 发	5	0

从配型后的32例移植结果看，其中HLA-Ⅰ类半相合的MBMT19例，移植成活18例，现无病存活9人。所有病人无急性移植物抗宿主病(graft versus host disease GVHD)发生，有10人发生慢性GVHD(cGVHD)。MBMT将成为无适合供者及独生子女患者移植的首选方法。而HLA-Ⅰ类、Ⅱ类全相合的12例及1例HLA-Ⅰ类相合、Ⅱ类不相合的PBSCT，已取得全部移植成活，现存活10人，仅1例有Ⅱ度一过性GVHD，6例发生慢性GVHD，这也与国内外多数研究结果一致。因此对于多数恶性血液病来说，有配型适合供者，其他条件许可时，应行骨髓或外周血干细胞移植等积极治疗措施。 参考文献

1，兰炯采.HLA血清学试验操作规程.中国输血杂志，1993，6：56

2，兰炯采，张祖文，张玉明．HLA-DQBI PCR-SSP基因分型技术.实验血液学杂志，1996，4（2）：220

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