吕 虹首都医科大学附属北京天坛医院 基因技术可给人类巨大的利益,但也给医学、伦理、法律和经济带来巨大冲击。基因检验滥用造成了资源浪费及不必要的医疗纠纷,基因隐私导致用人和保险歧视,但限制基因检验又对基因检验技术的发展造成负面影响。 美国卫生部(DHHS)为解决对基因检验安全和有效性的评估及了解有无必要进行更多的监督和管理。于1998年成立SACGT (Secretary’s Advisory Committee on Genetic Testing)。由13名来自基因学、法律、产业、消费保护
PCR的最早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 PCR的实现1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制,只是在试管中给DNA的体外合成提供以致一种合适的条件---摸板DNA,寡核苷酸引物,DN
基因 脱氧核糖核酸是于19世纪中叶发现的,当时孟德尔修道士进行了著名的豌豆培育实验,实验证实高度和颜色等物理特征可以经过后来称为基因的遗传单位从一代遗传给下一代。但是基因的物理特征却一直困扰着科学界,直到1944年纽约洛克菲勒研究所细菌学家奥斯瓦尔多·艾瑞(Oswald Avery)发现要把无害细菌转变成为导致肺炎的基因只需向无害细菌中导入导致肺炎的菌株即可。这些试验表明,基因是由脱氧核糖核酸构成,它使得许多研究者从此踏上寻求脱氧核糖核酸结构的漫长征途,以揭开基因对所有生物的影响之谜。 伦敦国
前言 幽门螺杆菌感染与多种不同的临床症状相关,这些临床症状涵盖了从简单的无明显症状胃炎到更严重的情况,如胃溃疡和胃部肿瘤形成。具体症状取决于幽门螺杆菌诱导的胃炎的严重性和分布情况:胃窦区的胃炎与酸的过度分泌和十二指肠溃疡的高风险相关,相反,分泌胃酸的胃体区胃炎则导致胃酸过少,渐进性胃萎缩,并增加胃癌风险。幽门螺杆菌与这些多种不同症状的关联形成了一个很有趣的科学问题,对这个问题的阐释不仅将解释溃疡和胃癌如何发展,也将成为大多数人类疾病中基因与环境相互关系的一个范例。炎症前期细胞因子白细胞介素 -
摘 要: cDNA微阵列已在基因差异表达、寻找新基因等研究方面获得广泛应用,但有关cDNA微阵列的制作,目前多采用多聚赖氨酸修饰的载玻片为探针固定载体,固定效果较差。用氨基硅烷处理的载玻片为载体制作cDNA微阵列,然后考察其固定效率、检测灵敏度、稳定性、实用性等指标。结果表明,用氨基硅烷处理的载玻片具有比多聚赖氨酸更令人满意的核酸固定效率、检测灵敏度,且稳定实用。因此,用氨基硅烷修饰的载玻片为探针固定载体制作cDNA微阵列较为理想。 关键词: 微阵列 生物芯片 修饰 cDNA 学科分类号:
摘 要:生物芯片是近年来国内外广泛重视的新技术,了解其技术特点,预测未来发展方向,对制定我们自己的生物芯片发展战略具有积极的参考价值。 关键词:生物芯片 生物微系统 生物信息 学科分类号:Q78 From Biochip to Biological Microsystem ZHU Bin, ZHAO Jian-Long, XU Yuan-Sen State Key Laboratory of Transducer Technology, Shanghai Institute of Me
一、细胞培养的条件和要求 1.所有与细胞接触的设备、器材和溶液等,都必须保持绝对无菌,避免细胞外微生物的污染。 目前最可靠和最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。 如:玻璃制品、布类、金属制品:6.8kg20min。 橡胶制品:3.6~4.5kg10min。 培养用液,如Hanks液,水解乳蛋白:3.6~ 4.5kg10min。 实验中染菌物品和动物尸体等:6.8 kg20min。 试管、吸管等,则可采用干热灭菌; 一切不适于加热灭菌的液体,如人工合成培养液、小牛血清、胰蛋白酶等溶液,可采用过滤法
一、蛋白质组学的分析鉴定技术 蛋白质组学研究的核心是将组织或细胞内蛋白质进行分离和鉴定,从中找到与重大生命活动、疾病发生以及生物进化密切相关的关键蛋白质。这也是生命科学研究的重要内容之一。在分离的基础上对样品进行分析鉴定是整个研究过程中的一个重要环节。 (一)、图像分析系统: 获得蛋白质双向电凝胶后,要对凝胶图像进行备份保存,从而以数字化图像的形式存储下来,而且要尽量完整地保留定性和定量信息,以利于进一步的分析。蛋白电泳图像分析系统主要包括二维电泳图像采集系统和二维电泳凝胶分析软件;图像分析
【摘要】 目的 了解近几年H1N1亚型毒株在深圳地区人群中活动加强及“O”相特性出现的分子生物学基础及其基因演变的特性。方法 病毒粒RNA经逆转录合成cDNA,用PCR扩增,产物纯化,采用双脱氧链末端终止法进行核苷酸序列测定并推导出其所编码的氨基酸序列。进化树分析用DNA-STAR公司出品的序列分析软件,MegAlign(1.03版)的Editseq(3.69版)。结果 根据病毒粒HA1基因特性,至少1995年以来深圳地区人群中同时流行着基因特性不同的三系毒株;1995~1997年H1N1毒株与
【摘要】 目的 SHEE细胞系是经人乳头状瘤病毒(HPV)18型E6E7基因诱导的永生化上皮细胞株,已传代超过50代。研究胎儿食管上皮永生化的细胞株SHEE生物学特性,包括增殖,分化和调亡。方法 细胞于199培养基培养,用光镜、电镜和荧光显微镜研究其生长率、形态和染色体分析;用流式细胞仪研究其细胞增殖动力学;用免疫组织化学方法研究Ki67和角蛋白和用末端转移酶标记(TUNEL)凋亡细胞。结果 细胞培养呈单层,锚定依赖和接触抑制生长。细胞生长曲线,增殖期3~8天,平顶期9~10天,衰亡期10天以后
【摘要】 目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV)和单纯疱疹病毒(HSV)等对宫颈癌的病因学作用。方法 应用聚合酶链反应(PCR)-核酸内切酶分型检测宫颈癌活检组织中HPV-DNA和HSV-DNA基因,以正常宫颈组织作对照。结果 在宫颈癌活检组织中HPV-16,18型和HSV-2型阳性率分别为38.9%和34.6%,与正常妇女宫颈组织阳性率均为3.2%比较,差异均有非常显著意义(P<0.001)。结论 HPV-16,18型和HSV-2型是诱发宫颈癌的重要病原因子。 Detection of human
关键词: 朊病毒;prp基因;表达 【摘要】 目的 研究与人类海绵状脑病发病有关的膜蛋白PrPc的生物学功用,同时以其为抗原建立有效的免疫学诊断方法。方法 采用PCR扩增并克隆2例中国人prp基因,经DNA序列分析后,亚克隆至GST融合蛋白表达质粒。结果 1例正常人prp基因带有点突变,导致形成终止密码,另1例prp基因序列与已发表的标准prp基因序列相同。在GST融合蛋白表达系统中,标准及突变prp基因可有效地表达完整及缺损的PrP蛋白。Western蛋白转印试验证实,所表达的GST-PrP
【摘要】 目的 用流式细胞仪(flowcytometer, FCM)检测周围血中CD4+、CD8+淋巴细胞,结合临床情况对HIV感染者和AIDS患者的免疫状况进行评价。方法 将抗凝全血进行白细胞分类计数,用双色荧光标记的单克隆抗体染色,经溶血和固定后,用FCM计数,从而得出CD4+、CD8+淋巴细胞
摘 要 目的 构建可在真核细胞内高效表达白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)的真核表达质粒pBK-IL-1ra,以便用于IL-1ra基因治疗研究。方法 采用分子生物学技术将人IL-1ra cDNA插入真核表达载体pBK-CMV中,构建成真核表达质粒pBK-IL-1ra。通过竞争性ELISA、原位
CTLA4-lg融合蛋白基因的表达及其生物学功能的初步研究 细胞与分子免疫学杂志 2000年第1期第16卷 分子免疫学 作者:郑宇 沈倍奋 黎燕 舒翠玲 胡美茹 裴武红 王建安 单位:郑宇 沈倍奋 黎燕 舒翠玲 胡美茹 裴武红 王建安(军事医学科学院基础医学研究所,北京100850) 关键词:CTL
Caspase与Bcl-2在凋亡发生和调控中的相互作用机制 军事医学科学院院刊2000年第24卷第2期 胡美茹 兰雨 张学敏 沈倍奋 摘 要 Bcl-2家族与Caspase家族是凋亡发生和调控机制中两项最重要的组成部分,弄清楚二者之间的关系对进一步掌握凋亡的本质及其调控具有重要意义,其中又以Bcl-
人细小病毒B19(human parvovirus B19,简称B19),1975年Cossart等[1]在筛选献血员乙型肝炎抗原时发现,是已知唯一对人类致病的细小病毒,无胞膜、耐热,直径23 nm,基因组为线性单链DNA分子,约5.5 kb。基因组右侧编码两个结构蛋白VP1(84K)和VP2(58
【摘要】 目的 比较异源双链、单链构像多态(SSCP)、异源双链-SSCP法筛查突变的效率,寻找简便有效的基因突变筛查方法。方法 应用聚合酶链反应(PCR)扩增23个已知的杂合子突变,分别以异源双链、SSCP、异源双链-SSCP法分析突变,对比各方法对突变的检出情况。结果 23个杂合子突变中,异源双
摘 要 生物质谱因其高灵敏度、高准确度、快速、易于自动化等特点,在生命科学领域的应用和研究日益广泛。该文综述了近年来生物质谱在蛋白质、核酸、糖类、药物代谢以及微生物检验等方面的应用及进展。 关键词:生物质谱;电喷雾;基质辅助激光解吸附;串联质谱 1 概述 生命科学的发展总是与分析技术的进步相关联,X
细胞因子的检测方法可分为分子生物学测定法,生物活性测定法和免疫化学测定法三大类。现拟就其检测技术的进展和现状作一简要介绍。 一、分子生物学测定法 这种方法是测定细胞因子mRNA的表达水平。由于细胞因子mRNA半衰期短和拷贝数少,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,因其灵敏性高和操作简便,比N