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血液细胞(血常规)检验中的几点注意事项

本站网址:WWW.LABDB.NET 来源:医学检验信息网 2006-11-17

执诚医疗仪器有限责任公司  学术部

  尿液分析是用目测、理学、化学、显微镜及其它仪器(各种尿液分析仪)对尿液标本进行分析,以达到对泌尿、循环、肝、胆、内分泌等疾病进行诊断、疗效观察及预后判断等目的。传统尿液分析有理学(颜色、透明度、气味等),化学(蛋白、糖、胆红素等)和沉渣镜检(各种有型成分)三部分。其中尿沉渣镜检被美国著名专家DaHelen Free称之为“体外的肾活检”。尿沉渣镜检包括白细胞、红细胞、各种上皮细胞(应规范成鳞状上皮、移行上皮、肾小管上皮、恶性细胞)、管型、精子、细菌、霉菌、结晶等多种成分,用于诊断各有其重要性。但传统的尿沉渣镜检受离心条件,沉渣制片方式,染色条件,操作者水平等方面的限制,导致结果重复性差,报告方式混乱等现象。
日本Sysmex公司1995年,利用流式细胞原理开发出UF系列尿流式细胞分析仪。该仪器以激光散射强度、散射宽度、荧光强度和荧光宽度识别计数红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌、结晶、精子及酵母样菌等,并对红细胞作形态学分类(正常细胞型、小细胞型、不可区分型),以助判明血尿出血部位。仪器测出电导率提供渗透压参考数。UF系列仪器在日本、欧洲及我国已经广泛使用。T.Kourl博士强调不需离心的尿颗粒成分测定是发现肾疾病 、泌尿道感染及病程观察中的高效敏感实验手段。1997年UF仪器在欧洲出了专集,参与该仪器临床应用经验讨论的是内科、急诊科、儿科居多。我国从1998年开始,北京、上海有UF仪器的评价报告,到现在全国各地多种医学杂志均有应用经验报道。Hannemann Pohi 总结了UF的特点(1)标本易处理;(2)直接自动进标本;(3)测定精度大大提高;(4)提供量化的数据报告单;(5)尿中有型成分检出敏感性增加;(6)促进检验流程的标准化。UF仪器可广泛用于尿液标本的大量过筛,减少每个标本镜检的繁杂手工操作。筛选出的病理标本(约20%)再集中精力镜检。使整个实验室的尿液分析报告既快速、又准确。
另外,UF仪器还可以广泛用于其它体液的细胞分析:如胸水、腹水、羊水、脑脊液、关节液等。有人报道用UF仪器从重危病人脑脊液中查出大量霉菌,对症治疗从而挽救了病人生命。

UF尿沉渣分析仪尿液正常参考值建议
        报告参数        中文名称          参考值范围
          RBC            红细胞          男 0-11/ul      女 0-25/ul
          WBC          白细胞          男 0-11/ul    女 0-25/ul
          EC              上皮细胞        男 0-6/ul      女 0-20/ul
          CAST            管型            男 0-2/ul      女 0-2/ul
          BACT            细菌            男 0-8000/ul    女 0-8000/ul
          Path CAST        病理管型                  阴性
          SRC            小圆上皮细胞              阴性
          X'TAL          结晶                      阴性
          YLC            酵母细胞                  阴性
          SPERM          精子                      阴性
          Other            其它                      阴性
          RBC-Info          红细胞信息                阴性(或normocytic)
          Total Count        总计数                  <40000/ul
          Conductivity      电导率                  19.8-42.5 ms/cm
各参数临床意义:
  (1)管型(CAST):管型是尿沉渣中与肾病密切相关的有形成分。UF仪器是定量测定管型(CAST),报告为每微升多少个;定性测定病理管型(Path CAST),报告为阴性或阳性。一旦报告阳性应镜检加以区别,对难以识别的管型应染色后鉴别。管型一般由血浆蛋白、肾小管分泌物、变形的肾小管上皮细胞、白细胞、红细胞及裂解产物所组成。传统的管型演变理论:上皮细胞管型  粗颗粒管型    细颗粒管型      蜡样管型,受到不同管型成分即多途径的形成转化的挑战。由脂肪变形的上皮细胞可形成脂肪管型;细菌、白色念珠菌、结晶等均可参与管型的形成。透明管型:正常人在激烈运动后或老年人的尿液中可少量出现,一般无临床意义。颗粒管型:颗粒是由于肾小管上皮细胞的变性崩溃而来。颗粒管型偶见于运动后、脱水及发热时。若大量出现,提示存在肾实质损害的可能。粗颗粒管型多见于慢性肾小球肾炎或肾病综合症。若颗粒管型与透明管型同时大量出现,多见于急性、慢性肾小球肾炎、肾病、严重感染及肾动脉硬化。细胞管型:上皮细胞管型的出现表示肾小管上皮有病变,常见于肾病、长期高热、重金属中毒及肾淀粉样变性。中山医大肾病研究室检查588例SLE尿后,提出尿中肾上皮细胞管型与病人存活率及预后有关。白细胞管型的出现常见于急性肾小球肾炎、狼疮性肾炎、多发性动脉炎、肾盂肾炎和细菌尿伴有尿路感染的病人。红细胞管型的出现表示肾脏内有出血,常见于急性肾小球肾炎、慢性肾炎急性发作期及溶血性输血反应等。混合管型是同时含有红细胞、白细胞、肾上皮细胞和颗粒等,它的出现表示肾小球肾炎反复发作、出血和血管坏死。常见于活动性肾炎、肾病综合征进行期、狼疮性肾炎及恶性高血压等病人的尿液中。蜡样管型是由于透明管型在肾小管内停留时间太久,表示肾小管有严重的变性、坏死,常见于慢性肾小球肾炎后期及肾淀粉样变的病人尿中。脂肪管型是肾小管上皮细胞脂肪变性后形成。常见于类脂性肾病及肾小球肾炎等病人的尿液中。
近期林泽许报道28例DIC病人尿液中均查见血小板管型,认为有超前诊断价值;从11例反复发作肾盂肾炎者尿中,检出了6例霉菌管型。日本学者在糖尿病、肾病的病人尿中查见了脂肪变形的空疮变形管型。Cheson研究了9例多发性骨髓瘤合并肾功能衰竭的尿液管型,有6例发现骨髓瘤管型。术间佐等在14例肾移植手术后尿沉渣中查到淋巴细胞管型和肾上皮细胞管型。
(2)红细胞:UF仪器是定量测定尿液中的红细胞,并可以与尿液干化学的隐血交叉互认。尿中出现红细胞的原因有肾前性、肾小球性和非肾小球性几种。肾前性一般说不是一种严格意义上的血尿,它多是体内发生原发性或继发性的溶血性疾病,红细胞破坏、血红蛋白游离形成血红蛋白尿。肾小球性血尿可见原发性急、慢性多系统感染、遗传性性疾病等,发病时由于炎症累及肾小球过滤膜,红细胞在通过滤过膜时挤压,或因渗透压改变使红细胞形态发生改变,常出现多形性、穿孔、出芽、面包圈等畸形红细胞。并且,肾小球性血尿UF仪器往往提示是小红细胞(Microcytic?)不均一型,在直方图上图形偏左。在非肾小球性血尿中红细胞形态基本不变,偶尔可见单一畸形,但不出现多形性畸形。非肾小球血尿红细胞大小正常,UF仪器提示体积正常(Normocytic?)均一型,红细胞直方图位置正常。临床上非肾小球血尿常见于尿路出血、感染、泌尿系统结石、结核或恶性肿瘤等。
(3)白细胞:UF仪器定量测定尿液中的白细胞,还可以测出尿液中平均白细胞前向散射光强度(WBC-MFI)。
尿中白细胞数量可帮助有关疾病(如泌尿系感染、膀胱炎、结核与肿瘤等)的诊断与鉴别诊断,通过动态观察病人尿中白细胞数量变化,来确定病人疗效观察和预后。干化学法和显微镜法虽然也能测尿中白细胞数,但干化学法粗糙,不能准确反映数量变化;显微镜法的条件难于控制,报告含糊不清,不能将治疗前后白细胞的数量变化反映出来。只有使用UF仪器才能观察到这种数量微弱的变化,指导临床进一步用药治疗。
利用白细胞激光散射强度和荧光强度的技术识别白细胞高活性和低活性的不同程度,来进一步对急性感染和慢性感染,以及恢复期作出判断。急性泌尿系感染白细胞>60/ul,且白细胞前向散射光强度强和荧光强度弱;慢性泌尿系感染白细胞轻度高于正常,且白细胞前向散射光强度弱和荧光强度强。
急性炎症时多见中性粒细胞,慢性炎症时多见淋巴细胞和单核细胞,特别是肾移植排斥反应和尿路淋巴瘘管尿中淋巴细胞增多;应用抗生素、抗癌药物引起的间质性肾炎,以淋巴、单核细胞增加为主;过敏性炎症、变态反应性疾病引起的泌尿系炎症,可见嗜酸性细胞增多。
(4)上皮细胞(EC):UF仪器能定量测定上皮细胞外,还能标出小圆上皮细胞(SRC)。上皮细胞由泌尿道上皮脱落而来,种类较多,大小不等。小圆上皮细胞是指细胞大小与白细胞相似或稍大,形态较圆的上皮细胞,它包括肾小管上皮细胞、中层和底层移行上皮细胞。当仪器提示小圆上皮细胞达到一定数量时,应镜检加以区分。
正常尿液可见少量上皮细胞主要是鳞状上皮细胞和移行上皮细胞;如数量增多,可见小圆上皮细胞,可认为是泌尿道炎症的表现。
肾小管上皮细胞:来自于肾小管,形态往往不规则,象白细胞,正常尿中不见或偶见,在急性肾小球肾炎时最为常见。成堆出现时,表示肾小管有坏死性病变。肾移植一周内,尿中可见较多的肾小管上皮细胞,随后可逐步减少至恢复正常。移行上皮细胞:来自于肾盂、输尿管、膀胱和尿道近膀胱段等处的上皮细胞。表层移行上皮体积大,呈不规则圆形,核位于中间,少量无多大临床意义。膀胱炎时可成片脱落。中层移行上皮细胞大小不一,常呈梨型、纺锤型或带尾型,核大呈圆形。中层移行上皮细胞多来自于肾盂,少量来自输尿管及膀胱颈部,这些部位炎症时可大量出现。底部移行上皮细胞体积小、原形。这种上皮细胞和肾小管上皮细胞统称为小圆上皮细胞。底部移行上皮的出现是各种炎症的产物。
(5)细菌(BACT):定量测定尿液中的细菌是UF仪器的一大特点。细菌检查的主要意义在于对泌尿系细菌感染的诊断。上海东方医院(上检2002.4)王春燕等用226例病人清洁中段尿分别做尿细菌培养和用UF仪器测定细菌。与中段尿培养相比,UF仪器细菌>8000个/ul时,诊断尿路感染的敏感度63.08%,特异性为94.4%,阳性预示值为82%,阴性预示值为86.36%,准确度为85.40%。所以UF仪器能快速、直接、较准确的计数细菌,是尿路感染筛选的良好方法。
(6)结晶(X’TAL):尿中析出的各种无机盐、结晶,取决于该物质在尿液中的饱和度,而饱和度又受尿液中酸碱度的影响。尿酸结晶:有三菱形、亚铃形、蝴蝶形等。此结晶一般无意义,但在新鲜尿液中大量出现并伴有红细胞时,又有肾或者膀胱刺激症状,多为肾或膀胱结石的征兆。非结晶性尿酸盐:主要是尿酸钠、钾的混合物,无色或砖红色,加热溶解,无临床意义。草酸钙结晶:草酸是植物性食物中的有害成分,与钙结合形成草酸钙,经尿液排出体外。一般无意义,但新鲜尿中大量出现并伴有红细胞,又有肾或者膀胱刺激症状,多为肾或膀胱结石的征兆。亮氨酸和酪氨酸结晶:亮氨酸结晶呈淡黄色球形或油滴状折光性很强。酪氨酸结晶为很细的针状,呈束形,黑色。此两种结晶同时在尿中出现,多见于急性肝萎缩、急性磷中毒、白血病等。胱氨酸结晶:此结晶为无色折光性很强的六角形板状结晶。此结晶是蛋白质的分解产物,正常尿液中少见,大量出现时多为肾或膀胱结石之征。胆固醇结晶:此结晶为方形缺角的无色片状结晶,较轻,常浮于尿液表面。正常尿液中少见,可出现于膀胱炎、肾盂肾炎、或乳糜尿等尿液中。磺胺类结晶:临床上并非所有服用磺胺药物的病人尿液中都出现此结晶,仅少数病人才出现,一般认为用药过量为主要原因。大量磺胺结晶的出现,表示在输尿管、肾盂等处有形成沉淀,阻塞尿路的危险,故可形成无尿或血尿。磺胺结晶无色或微黄色,有长方形、哑铃性、花瓣形、一束麦杆形等。
(7)酵母细胞(YLC):尿中出现酵母细胞是泌尿道真菌感染的指征,在指导临床用药上有重大意义。
(8)电导率(CONDU):尿液的电导率反映渗透压的水平,从而间接了解肾的功能状态,老年人的尿液电导率明显降低(临检,2001。19;218),表明老年人肾小管浓缩功能下降。有资料表明人40岁以后,每十年肾小球滤过率(GFR)就降低10%。


注意:容器清洁,取中后段尿,尿液新鲜,及时检查是尿沉渣分析成功的关键。
      报告单上最好有尿液留取时间、标本收到时间及检测完成时间。

 

尿流式沉渣分析、尿液干化学与传统手工操作之差异
尿流式沉渣分析、尿液干化学与传统手工操作是三种完全不同原理的分析方法,虽然都能分析尿中红细胞、白细胞、蛋白质、细菌等,但由于原理不同,结果肯定不一致。只有认识了它们的原理,才能正确理解、认识这种差异。
蛋白质:干化学的蛋白测定只对白蛋白敏感,对球蛋白不敏感、对粘蛋白和本周氏蛋白无反应。所以,干化学蛋白阴性,并不能代表尿中无蛋白质。干化学蛋白质的结果基本不能反映肾小管损伤引起的蛋白尿。因肾小管受损、重吸收障碍。但由于肾小球功能完好,大分子蛋白未被滤过,尿中出现α1、α2微球蛋白、轻链、视黄醇结合蛋白、溶菌酶等小分子蛋白。这类尿蛋白干化学法阴性,传统手工法阳性。此尿用UF流式沉渣仪检查,可能发现管型。
红细胞(隐血):干化学法隐血实验对完整的RBC、破损的RBC和游离的血红蛋白均能反应,测定的隐血是三者的总和。大多数含RBC的尿液中都有溶解的RBC、游离Hb,这是临床常反映隐血灵敏度太高的主要原因。因破粹RBC、游离Hb无论是人工镜检,还是UF流式仪分析都不能检出。
白细胞:干化学测定白细胞是测的白细胞脂酶,嗜中性细胞含此酶,单核细胞含得很少、淋巴细胞不含此酶。所以干化学法白细胞只检测了嗜中性细胞。而UF尿流式沉渣仪和人工镜检是检测的全部白细胞。当肾结核、肾移植排斥反应时都是淋巴细胞在尿中大量出现,而干化学基本不能测出。
细菌:UF尿流式仪是定量测定细菌,不论何菌全部计数;人工镜检很难定量测定细菌;干化学是通过测亚硝酸盐阳性来估计,但仅部分革蓝氏阴性的杆菌含亚硝酸盐还原酶,此反应阳性,而其它细菌此反应都是阴性,不能被测定。所以此反应阴性,而UF流式仪可能查出大量细菌。球菌引起的尿道炎症即可出现这种状况。

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