浓缩血小板质量与采前血小板计数的关系
1.1 制备血小板的塑料袋 400ml含CPD采血3联袋(上海医用高分子厂出品),400ml含CPD采血4联袋(天津医用高分子厂出品)。
1.2 离心机 Sorvall RC-3BP型离心机,最大离心半径25.52cm:Baxter CS-3000plus血细胞分离机及配套耗材。
1.3 微细胞计数仪Sysmex-820型细胞计数仪及配套Symex-270自动稀释仪。
1.4 献血者筛选 根据细胞计数,手工制备浓缩血小板,其血小板计数>120×109/L,平均145.6×109/L。机采血小板,其血小板计数>150×109/L,平均190.4×109/L。
1.5 富浆法 400ml全血通过第1次离心(1380g,10min),收集富含血小板血浆,再第2次离心(2919g,12mim),留取血浆和沉积于袋底的血小板共约50ml。
1.6 梯度离心法 以含CPD保养液的4联袋采集的全血400ml,通过第1次梯度离心(461g,4min+2650g,4min,8min),收集血浆连同白膜层及邻近的红细胞,室温放置1h,再经第2次梯度离心(285g,2min+461g,4min,6min),收集上层血浆,最后将血浆经第3次离心(4560g,6min),留取血浆和沉积于袋底血小板共约60ml。
1.7 机采法 通过Baxter CS-3000Plus血细胞分离机采集,界面探测值IDO(lnterface Detector Offset)设置于10。
2 结果将献血者分筛选和随机两组,在血袋和离心条件相同的情况下,由富浆法、梯度离心法和机采法制备的浓缩血小板细胞得量进行比较,结果分别见表1~3。3种方法制备的浓缩血小板结果与美国血库协会(AABB)标准比较见表4。
从表4可见,3种方法筛选组制备的浓缩血小板,除富浆法白细胞污染超标外,余均达标。而随机组只有机采法和梯度离心法中白细胞污染达标外,其余均不达标。
表1 400ml全血富浆法制备浓缩血小板的细胞得量
| 组别 | n | 血小板计数×1010 (±s) | 白细胞计数×108 (±s) |
| 随机 | 17 | 1.75±1.05 | 7.83±0.33 |
| 筛选 | 17 | 6.27±0.15 | 3.20±1.00 |
两组比较:血小板数:t>2.921,P<0.01;白细胞数:2.120<t<2.921 0.01<P<0.05。
表2 400ml全血梯度离心法制备浓缩血小板的细胞得量
| 组别 | n | 血小板计数×1010 ±s | 白细胞计数×108 (±s) |
| 随机 | 12 | 3.21±0.23 | 1.71±0.33 |
| 筛选 | 12 | 6.68±0.36 | 1.42±0.22 |
| P<0.01 | P<0.01 |
表3 Baxter CS-3000 Plus血细胞分离机机采浓缩
血小板(200ml)的细胞得量
| 组别 | n | 血小板计数×1011 (±s) | 白细胞计数×108 (±s) |
| 随机 | 41 | 3.01±0.15 | 4.82±0.49 |
| 筛选 | 41 | 3.66±0.23 | 4.55±0.34 |
| P<0.01 | P<0.05 |
表4 本实验结果与美国血库协会(AABB)标准比较
| 标准 | 富浆法 随机 筛选 | 梯度离心法 随机 筛选 | 机采法 随机 筛选 | ||||
| 血小板绝对数(×1010) | >4.9 | 1.8 | 6.3 | 3.2 | 6.9 | 7.5 | 9.2 |
| 白细胞污染(×108) | <1.8 | 7.8 | 3.2 | 1.7 | 1.4 | 1.2 | 1.1 |
注:机采法血小板细胞得量按总量的1/4计算3 讨论
目前,国内多数单位制备浓缩血小板的成分血多取自随机采集的新鲜全血,因献血者的细胞基数不等,造成细胞得量差异较大。本文结果说明,无论是富浆法、梯度离心法或机采法制备的浓缩血小板,对献血者采前的筛选工作将直接影响到浓缩血小板的产品质量。因此,献血者采前的血小板计数是必要和有意义的。
