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抗凝剂浓度对血细胞计数仪结果的影响

本站网址:WWW.LABDB.NET 来源:医学检验信息网 2007-02-26

抗凝剂和稀释低渗作用对血细胞计数仪有一定的影响[1]。本文用NE-1500血细胞计数仪检测不同EDTA-K2浓度的标本,观察结果如下:

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 日本东亚公司生产的NE-1500血细胞计数仪及配套试剂,定标液,全血质控物。美国The AdvancedTM Micro-osmometer Model 3MO型晶体渗透压计。

1.2 标本来源 随机抽取正常体检者61名。 1.3 方法 150 g/L EDTA-K2抗凝剂,取A、B、C 3管,分别加30 μl、50 μl、50 μl,抽取体检者静脉血5.0 ml,分别加入A、B、C 3管2.0 ml、0.5 ml、0.2 ml血,混匀,对应的EDTA-K2浓度为:2.25 mg/ml、15.5 mg/ml、37.5 mg/ml,测得血浆渗透压分别为:331 mosm/L、371 mosm/L、428 mosm/L。A组EDTA-K2浓度为抗凝剂标准[2]的临界高值,设为正常对照组,共61例,B组53例,C组57例。用NE-1500血细胞计数仪检测,记录结果。对提示异常者均进行人工镜检。 2 结果

3组红、白细胞参数的结果见表1。

表1 不同EDTA-K2浓度的红、白细胞参数结果(±s)
测定项目 A(n=61) B(n=53) C(n=57)
RBC(×1012/L) 4.66±0.78 4.20±0.43** 3.73±0.39**
HGB(g/L) 135±13 126±12* 113±11***
HCT(%) 42.5±3.6 34.7±3.0*** 31.5±2.8***
MCV(fL) 79.7±5.7 82.4±6.9* 84.5±6.2***
MCH(pg) 25.8±1.9 30.1±2.6*** 30.4±2.2***
MCHC(g/L) 321±8 364±9*** 358±8***
RDW-SD(fL) 38.8±2.1 40.4±2.5** 40.8±2.3***
RDW-CV(%) 13.2±1.0 13.4±1.0 13.2±1.0
WBC(×109/L) 6.61±1.70 6.18±1.50 5.63±1.49***
NEUT(%) 56.8±7.8 52.0±6.6** 51.7±8.5**
LYMPH(%) 33.2±7.2 34.5±7.6 33.1±7.6
MONO(%) 5.6±1.1 8.5±2.7** 10.3±2.4**
EO(%) 3.4±3.2 3.2±2.8 3.1±2.9
BASO(%) 1.1±0.5 1.1±0.6 1.2±0.5
注:与A组相比,*P<0.05,**P<0.01,*** P<0.005 3 讨论 3.1 A、B、C 3组所加抗凝剂的体积分别占标本总体积的1.5%、9.0%、20%,A组所占比例极少,但B、C两组标本模拟临床抽血不合比例的现象,被明显稀释,故RBC、HGB、WBC的结果明显低于A组,而B、C两组的血浆渗透压明显高于A组,使抗凝血细胞停留在高渗环境中,细胞水分子与细胞外溶质相互交换,使细胞渗透压升高,在稀释过程中产生的低渗作用,又使细胞体积增大[3],据MCV、HGB换算得出的其它RBC参数也发生相应的变化[4]3.2 在油镜下发现:高渗作用使B、C两组的WBC体积、核浆比例、核的密度均发生变化,使仪器检测时把部分中性粒细胞错判成单核细胞。并显示出单核细胞增多症、异型淋巴、有核红细胞等假性信息。 3.3 根据国际血液学标准化委员会(ICSH)1993年文件建议,血细胞计数应用EDTA-K2为抗凝剂,用量为EDTA-K2·2H2O 1.5 mg~2.2 mg[2]抗凝1 ml血,为防止稀释低渗作用,EDTA-K2抗凝剂应用干粉,不用水溶液,可防止稀释效应。 参考文献

1 Knig C M,Rose K J,Evans D L.The influence of anticoagulant,storage temperature and time on equine plasma locate concentration.Aust Vet J,1994,71(11):382

2 叶应妩,王毓三主编.全国临床检验操作规程.南京:东南大学出版社,1991.65—68

3 丁颖,王正芳,丛玉隆.血液保存时间和温度对激光法检测红细胞系统参数的影响.临床检验杂志,1996,14(3):150—151

4 丛玉隆,王淑娟主编.今日临床检验学.北京:中国科学技术出版社,1997.10—15

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