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血清Cj抗体、GM₁抗体和格林-巴利综合征的相关性研究

中国神经免疫学和神经病学杂志 1999年第1期第6卷 论 著

作者：忻琪珺 程源深

单位：忻琪珺 宁波医疗中心 李惠利医院神经科，宁波 315040；程源深 浙江医科大学附属二院神经内科

关键词: 格林-巴利综合征；空肠弯曲菌肠炎；GM₁抗体 摘要 目的 格林-巴利综合征(GBS)病因及发病机理探讨。方法 采用ELISA法测定30例格林-巴利综合征(GBS)患者血清抗空肠弯曲菌抗体(Cj-Ab)及GM₁抗体(GM₁-Ab)，并与临床严重程度进行相关分析。结果 GBS组血清Cj-IgG、IgM阳性率分别为60%、30%，较对照组30.8%和7.7%为高，两组差异有显著性，P值均小于0.05。GBS组GM₁-IgG阳性率为38%，而对照组为2.1%，经检验两者差异也有显著性，P值均小于0.05。结论 Cj近期感染与GBS发病相关，而GBS的两种抗体与临床严重程度无明显关系。 中图号 R745.4 Study on Antibodies to Cj and GM₁ in Guillain-Barre Syndrome

Xin Qijun Cheng Yuansheng

(Department of Neurology,Ningbo Medical Centre Li Huili Hospital,Ningbo 315040)

Objective Study on etiology and pathogenesis of Guillain-Barre syndrome.Methods Anti-gangliosides GM₁ and anti-Cj antibodies in serum were examined in GBS and controls with ELISA assay.Relative analysis was made between those antibodies with clinical severity of GBS.Results We found anti-Cj IgG,IgM in 18 cases(60%) and 9 cases(30%) of GBS patients,anti-GM₁-IgG in 11 cases(36.7%).There was significant difference for the positive rate between GBS patients and controls group (P＜0.05).Conclusion Our findings suggested that recent infection of Cj was closely related with the development of GB syndrome. Key words Guillain-Barre syndrome;campylobacter jejuni enteritis;anti-gangliosides GM₁ antibody 格林-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome,GBS)是一种周围神经系统急性炎性脱髓鞘疾病，其病因及发病机理尚未定论，多数学者认为它是一种感染后自身免疫或变态反应性疾病，发病与空肠弯曲菌(campylobacter jejuni,Cj)感染有关^［1～4］，并在Cj感染后诱发的GBS患者血清中发现GM₁抗体也增高^［5～7］。推测其发病途径是：(1) Cj与人类GM₁等周围神经成分存在有交叉抗原，感染Cj后产生抗体，通过交叉反应而导致了神经损害^［8］；(2) Cj产生霍乱样肠毒素，与周围神经的神经节苷脂紧密结合，从而产生神经毒性作用，神经膜上GM₁脱落于外围血中诱导产生抗体^［9］。 Winer^［10］和Yuki^［11］等认为，Cj感染后诱发的GBS患者临床表现较重，不易缓解，且血清GM₁抗体往往较高，故认为血清Cj抗体、GM₁抗体测定可作为GBS严重程度、预后的指标，而Uwe Enders等则持反对意见^［12］。 本研究拟就血清Cj抗体、GM₁抗体阳性与GBS的关系问题进行研究，对GBS病因及发病机理进行讨论。 1 材料和方法 1.1 材料

1.1.1 试剂：空肠弯曲菌菌株(浙江省防疫站)，马抗人IgG、IgM抗体(上海生物制品研究所)，辣根过氧化物酶(Sigma，美国)，GM₁(Sigma，美国)，酶标仪(上海三科仪器厂318-MC)。

1.1.2 临床标本：收集浙医二院神经内科1996～1997年住院患者血清1 mL，均新鲜分离，放入-20℃储存备用，共56例。GBS组30例(其中男21例，女9例)，年龄14～68岁，平均年龄(35±17)岁。病前腹泻史或腹痛、呕吐者5例，上感史10例，不明原因发热5例，风疹病史1例，水痘病史1例，急性无黄疸型乙肝1例，病前无诱因者7例。发病后5～60天(d)收取血清，平均病程(18±12) d。Cj抗体对照组26例，性别、年龄均与实验组相匹配。均为病因明确，同期住院患者，包括急性脑血管意外、高血压病、颅内高压症、症状性癫痫、运动神经元病等。以上患者2个月内均无腹泻病史。GM₁抗体对照组为健康献血员，其中GM₁-IgG组94例，GM₁-IgM组76例，其年龄、性别与病例组相匹配。

1.2 方法

1.2.1 血清Cj-Ig测定：在改良Skirrow培养基上收获Cj菌，离心洗涤3次。用0.01 mol/L、pH4 PBS稀释成10⁷～10⁸ mL超声粉碎(30 s×5，冰水浴)2000 r/min离心弃沉淀，上清液稀释，1∶400包被微孔，4℃过夜，次日取出洗涤3次；加入体积分数为10%小牛血清封闭37 ℃ 30 min，洗涤2次；加入标准品用稀释待检样品37℃ 30 min，洗涤3次；加入酶标抗体(酶标IgG 1∶400，酶标IgM 1∶200)37℃ 30 min，洗涤3次后用OPD显色，2 mol/L硫酸终止反应，用空白孔调零，测定各孔A值，根据标准曲线计算各样值。以上稀释剂为0.01 mol/L pH7.4 PBS，洗涤液为含0.05%(体积分数)的Tween-20。