医学检验信息网 检验医学 2007-2-2 13:35:42

摘要 观察了在当前自动化分析条件下，血清葡萄糖测定结果明显偏低的现象。对肝素D-甘露糖、肝素D-甘露糖NaF和速效抗凝剂对血葡萄糖的保护作用以及对其它生化检查的适用性进行了探讨。HMF对血葡萄糖的保护作用良好，对其它生化检查的适用性较广。 为阻上血液标本中葡萄糖的体外分解，《全国临床检验操作规程》指明采用草酸钾-氟化钠作抗凝剂。随着自动生化分析仪的普及，有的实验室为求方便，采用血清样品一次完成包括血葡萄糖在内的成套生能较好阻止血葡萄糖体外分解，又能兼作其他检查的抗凝剂实属必要。兹将我们的有关实验结果报道如下。化检查，造成成批血葡萄糖结果人为偏低。因此，重申这一血葡萄糖分析前的质控措施，寻找既 1 材料与方法 1.1 抗凝管配制 肝素D-甘露糖(HM)抗凝管：每管加60 g/L D-甘露糖溶液300 μl，再加6250 kU/L肝素钠注射液5 μl，肝素D-甘露糖氟化钠(HMF)抗凝管：每管加含有60 g/L D-甘露糖和2 g/L NaF的水溶液300 μl，再加6250 kU/L肝素钠注射液5 μl；速效抗凝剂(QAAC)抗凝管：以柠檬酸：柠檬酸钠：EDTA·2Na：NaF=3.4：1.6：4.8：0.2的比例^［1］，配制成每升含总溶质100 g的水溶液，每管加300 μl。各管均置37°C烘干。 1.2 血标本留取 取2名志愿供血者静脉血液，各分装3 ml于不含和含上述抗凝剂的各管内，用于观察血葡萄糖体外分解速率。抗凝血液中抗凝剂含量为：HM管含肝素10 kU/L,D-甘露糖6 g/L；HMF管含肝素10 kU/L，D-甘露糖6 g/L，NaF 0.2 g/L；QAAC管含总溶质10 g/L。另取受检者(n=23)静脉血液，每例取3 ml加于HMF管，另取3 ml不加抗凝剂，作其它生化检查对照试验用。 1.3 测定项目与试剂 血葡萄糖(Glu,HK法)和肌酐(Cr,酶法)试剂盒系朗道公司产品；ALP、GGT、LD、Mg、iP试剂盒系慈城生化试剂厂产品；α-L-岩藻糖苷酶(AFU)和谷氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)系夸克公司产品；Lp(a)系Wako公司产品；K、Na、Cl试剂盒由迅达公司生产；CK由长征公司生产；ALT、AST、Amy、TP、Alb、T-Bil、D-Bil、Urea、UA(尿酸)、T-Ch、TG、HDL-Ch、LDL-Ch、ApoA₁、ApoB、Ca试剂盒系宝灵曼公司生产。 1.4 仪器 DSI 903 Na/K/Cl分析仪，用于Na、K、Cl测定；日立7060自动生化分析仪，用于其他各项测定。 1.5 数据处理和统计方法 每例样品经两次重复测定，结果取均值。不同抗凝剂不同时间测定的血葡萄糖结果，用方差分析；不加和加HMF样品各项生化检查结果比较，用配对资料t检验，并在相关分析基础上求出回归方程。 2 实验和结果 2.1 将2名志愿供血者之血标本，在15分钟内分离出部分血清和血浆，立即测定血葡萄糖，嗣后放置室温，在抽取血液后1、3、8、18小时再进行分离和测定。每次测定吸出样品后，即轻轻混匀全血，待下一次临测定前离心分离。血清和血浆均无溶血。测定结果见表1。 表1 用不同抗凝剂不同时间测定血葡萄糖结果(，mmol/L)

时 间	无抗凝剂	HM	HMF	QAAC
立 即	5.61	5.73	5.76	5.76
1小时	5.32	5.66	5.77	5.73
3小时	4.55	5.57	5.68	5.68
8小时	3.01	5.36	5.78	5.75
18小时	1.85	5.21	5.73	5.42
24小时	1.31	5.13	5.69	5.27

结果表明，不加抗凝剂的血标本中，血葡萄糖浓度迅速而明显下降。而HMF对血葡萄糖的保护作用最好。 2.2 将各管在“立即”分离的血清和血浆，作其它各项检查，结果见表2。3 讨论 3.1 表1显示，无抗凝剂的血标本和其他各管比较，即使立即测定血葡萄糖，结果已有下降，1～3小时下降明显，18～24小时的剩余血葡萄糖已降至33%～23%。我们曾随机取104名病人，每个病人采血时分成草酸钾-NaF抗凝血(制血浆)和非抗凝血(制血清)，在日立7060生化分析仪上，用HK法测定血浆和血清葡萄糖浓度。全部操作按日常工作循序进行，当日上午完成测定。室温15°C。测得血浆葡萄糖浓度(X)范围为4.25～16.25 mmol/L，均值为5.71 mmol/L；血清葡萄糖浓度(Y)为3.6～15.7 mmol/L，均值为5.08 mmol/L。经成对资料比较t检验，t=8.17＞t_0.001(100)，P＜0.001。回归分析得=1.003X－0.661，r=0.969。说明在日常工作中，如不注意防止血葡萄糖体外分解，会明显影响糖尿病的诊断和监护。尤应指出，这种误差，既不能借质控品分析发现，也不能在室间质评中反映出来。 3.2 由于NaF阻止葡萄糖分解的作用缓慢，草酸钾对多种生化检查存在干扰，我们放弃了对草酸钾-NaF的选择。根据文献报道^［2］，我们对D-甘露糖对血糖的保护作用进行了观察，在肝素抗凝血中以1 g/L的浓度间隔加入D-甘露糖，使标本中D-甘露糖浓度在2～6 g/L之间。室温3小时后血糖下降百分比依次为7.8%、7.4%、6.3%、5.2%和3.7%。考虑到D-甘露糖是HK的竞争性抑制剂^［3］，我们用两份不同葡萄糖浓度的混合血清，按上法分别制成不含和含2～6 g/L D-甘露糖的样品，用HK法测定葡萄糖浓度，每种浓度测定5次。结果经方差分析，F=0.717和2.0，均小于F_0.1(5，24)，P＞0.1。说明血清中D-甘露糖在0～6 g/L范围内，用朗道HK法试剂盒测定的葡萄糖值无显著差异。 表2

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