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革兰阴性菌β-内酰胺酶的研究进展

医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:42
目前已发现ESBLS有3类约60种,其分类依据各种酶的等电点、及耐药基因的组成。 1、TEM系列 约47种 其等电点<7.0 2、SHV系列 约10种 等电点>7.0 3、非TEM及SHV系列 共3种 等电点不确定 所有ESBLS其编码基因都在质粒上,DNA大小不等,23kbs?00kbs。 二、 ESBLS特征

如同上表所列的,此类酶不仅可水解不耐酶的青霉素类、第一、第二及绝大多数第三代头孢菌素类抗菌素,也可水解耐酶的广谱头孢菌素如头孢噻肟(Cefotaxime)、头孢他啶(Ceftaxidime)、单酰胺菌素(如氨曲南aztreonam)等,但含有7-α甲基侧链的头霉素类如头孢西丁、头孢替坦等相对稳定。且能被克拉维酸、舒巴坦所抑制。

1、分解三代头孢菌素及单环酰胺类如氨曲南。

2、存在耐药不均一性,但即使体外试验敏感治疗往往失败。

3、按法国生物-默里埃公司专家系统提示:若药敏试验中确定为ESBLS。即三代头孢和氨曲南都应报告耐药。

三、ESBLS检测方法

1、单纸片法 (Kirby-Bauer Single disc-diffusion)

头孢泊肟(cephalosporin)≤22mm 氨曲南(aztreonam)≤27mm 头孢他啶(ceftazidime) ≤22mm 或这三种抗生素的MIC增加≥2ug/ml,应怀疑ESBL株。

检测正确率:56_89%。

2、双纸片协同法(double-disk diffusion test )

在以上三种纸片旁边25mm 或30mm处加贴张克拉维酸纸片,观察两纸片协同作用情况。

检测正确率:96%。

3、圆环估计法( disc approximation test )

检测正确率:63_79%

4、小片扩散法( tablet diffusion test )

检测正确率:88%

5、琼脂稀释法( agar dilution diffusion test )

检测正确率:86_95%

6、抑制剂增强扩散法(inhibitor-potentiated disc-diffusion test )

此法见于杂志:J Antimicrob Chemother 1998:42(1);49?4。由香港大学微生物部的Ho PL,Chow KH等创建。此法本质也是纸片扩散法,只是在M-H平板中加入4mg/L克拉维酸,使得头孢他定、头孢噻肟、头孢三嗪或氨曲南的换菌环比不加克拉维酸是增大10mm以上,即此菌为ESBLS阳性。

检测正确率:100%。

7、E-TEST法 ( ESBLS E-test method )

按E-TEST操作指南进行。使用TZ(头孢他啶,复达兴)以及TZL(头孢他啶/棒酸)药敏条。两者结果若TZ的MIC>TZL4倍者,即为ESBL阳性。另一种为E-TEST测试ESBL专用条:两端分别为TZ及TZLMIC比值:TZ/TZL>4表明有ESBL产生。

检测正确率:89-96%

8、自动化仪器法

VITEK_AMS(GNS-NT卡)

此卡有4个孔用于测定ESBL, 0.5ug/ml头孢噻肟(凯福隆)、头孢噻肟+克拉维酸(4ug/ml)、0.5ug/ml 头孢他啶(复达兴)、头孢他啶+克拉维酸(4ug/ml )。当生长控制孔达到阈值后,即开始分析这些孔的生长情况变化,如果头孢噻肟+克拉维酸孔比头孢噻肟生长浊度减少50%或以上即提示ESBL存在。可用同样方法观察头孢他定的结果。细菌生长减少,证实了克拉维酸对ESBL的抑制作用。

检测正确率:98_100%。

四、对产ESBLS细菌的治疗原则

  1. 首先碳青霉烯类抗菌素,如泰能
  2. 复合三代头孢菌素类,如舒普生,但治疗时其剂量要尽可能在一些。
  3. 头霉素类,如头孢西丁、头孢替坦等,但治疗成功率最多只有70%。
  4. 环丙沙星、阿米卡星等必须根据药敏结果给药。
五、减少ESBLS细菌产生的策略
  1. 隔离带菌者
  2. 提高抗菌素的合理应用率,减低选择压力。

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