医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:40

±：可疑阳性物制品鉴定所提供。 3.用于检测产ESBLs菌的Etest法纸条购于倍肯公司，底物为头孢他啶（CAZ），MIC刻度范围：头孢他啶0.5～32（0.5，0.75，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，12.0，16.0，24.0，32.0）μg/片，头孢他啶+克拉维酸(CAZ +C) 0.064～4（0.064，0.094，0.125，0.19，0.25，0.38，0.5，0.75，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0）μg/片。药敏纸片头孢他啶（CAZ）30 μg/片，头孢塞肟（CTX）30 μg/片，氨曲南（AZT）30 μg/片，阿莫西林20 μg+克拉维酸10 μg/片，氨苄西林10 μg+舒巴坦10 μg/片，均购自北京天坛药物生物技术开发公司。 4.抑制剂：克拉维酸由南京药厂提供，舒巴坦由深圳药厂提供。 5.MHA琼脂培养基购自杭州天和微生物试剂有限公司。 二、方法 1.初步筛选试验：取MHA琼脂培养基接种临床分离纯化菌株，选用CAZ、CTX、AZT按标准纸片扩散法进行操作，35℃培养18～24 h。抑菌环以CAZ≤22 mm、CTX≤27 mm、AZT≤27 mm为高度怀疑的ESBLs菌株。质控标准大肠埃希菌ATCC25922作阴性对照，抑菌环为CAZ 25～32 mm、CTX 29～35 mm、AZT 28～36 mm。 2.Etest法：培养基及培养条件同初步筛选实验，方法按说明书操作。结果判定：头孢他啶与头孢他啶+克拉维酸MIC刻度比值＞5为产ESBLs阳性，≤5为阴性。 3.单纸片扩散法：单纸片加抑制剂克拉维酸扩散法：取MHA琼脂培养基接种临床分离纯化菌株，选用CAZ、CTX和AZT纸片，并另外在3种纸片上分别加克拉维酸10 μg，采用标准纸片扩散法，35℃培养18～24 h。分别测定3种纸片单独和加克拉维酸 表2 20株疑产ESBLs肺炎克雷伯菌确证试验结果

菌株 编号	双纸片扩散法	单纸片扩散法
阿莫西林+克拉维酸	氨苄西林+舒巴坦	克拉维酸	舒巴坦	Etest法
CTX	CAZ	AZT	CTX	CAZ	AZT	CTX	CAZ	CTX	CAZ	CAZ	CAZ+C	MIC比值
5	-	-	＋	-	-	-	＜5	≥5	≥5	＜5	＜0.500	0.125	-
6	-	-	-	-	-	-	＜5	≥5	＜5	≥5	0.000	0.000	-
8	-	-	-	-	-	-	＜5	＜5	＜5	＜5	0.500	0.125	4.000
10	＋	＋	＋	-	±	＋	≥5	≥5	≥5	＜5	2.000	0.250	8.000
20	-	-	-	-	-	-	＜5	＜5	＜5	＜5	0.750	0.500	1.500
23	-	-	-	-	-	-	＜5	＜5	＜5	＜5	0.500	0.190	2.600
36	-	-	-	-	-	-	＜5	＜5	＜5	＜5	0.500	0.750	0.660
40	＋	-	＋	＋	-	-	≥5	＜5	≥5	＜5	0.750	0.190	3.940
42	＋	＋	＋	-	-	-	≥5	≥5	≥5	≥5	8.000	1.500	5.300
46	-	-	-	-	-	-	≥5	≥5	≥5	≥5	0.000	0.000	-
50	-	-	-	-	-	-	＜5	＜5	＜5	＜5	0.500	0.190	2.630
53	＋	-	＋	＋	-	-	≥5	＜5	≥5	＜5	1.000	0.280	3.500
56	-	-	-	-	-	-	＜5	＜5	＜5	＜5	0.750	0.190	3.900
62	-	-	-	-	-	-	≥5	≥5	≥5	≥5	0.000	0.000	-
68	-	-	-	-	-	-	＜5	≥5	＜5	≥5	0.000	0.000	-
71	-	-	-	-	-	-	＜5	＜5	＜5	＜5	＜0.50	0.125	-
77	-	-	＋	-	-	-	＜5	≥5	≥5	＜5	0.500	0.125	4.000
78	＋	＋	＋	-	＋	＋	≥5	≥5	≥5	＜5	1.500	0.250	6.000
80	＋	-	＋	-	-	-	≥5	≥5	≥5	≥5	2.000	0.380	5.260
83	-	-	-	-	-	-	＜5	＜5	＜5	＜5	＜0.500	0.125	-
阳性	6	3	8	2	1	2	8	10	10	6			4.000
合计	8	4	12	12	4.000

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