仪器法与纸片协同法检测超广谱β-内酰胺酶的结果比较
【摘要】 目的 了解VITEK-AMS 检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶 （ESBLs）的可靠性，并调查本院这两种菌的产ESBLs情况。方法 用VITEK-AMS专用药敏卡GNS-506进行ESBLs检测，并以头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南为底物，用纸片协同试验作对照。结果 仪器检测 48株肺炎克雷伯菌中有24株ESBLs为阳性，用纸片协同法对照结果一致。检测102株大肠埃希菌中，仪器检出41株阳性，纸片协同法对照也为阳性，但仪器检测的61株阴性菌中，纸片协同法对照有19株为阳性。结论 VITEK-AMS检测本地区产ESBLs菌株尚可能存在一定的局限性，建议各地根据感染菌株的特点及三代头孢菌素的使用情况，用多种底物检测 ESBLs。 Detection of extended-spectrum-β-lactamases with VITEK-AMS and double-disk synergy test
ZHOU Tieli DAI Meijie CHI Shengying
（Department of Clinical Laboratory, First Affiliated Hospital, Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000, China）
【Abstract】 Objectives To investigate the reliability of VITEK-AMS for the detection of strains of E.coil and K.pneumoniae that produce ESBLs, and to determine the prevalence in our hospital of the two strains producing ESBLs.Method VITEK GNS-506 was used to detect ESBLs, and was compared with double-disk synergy test. Results Among 48 strains of K.pneumoniase detected using VITEK GNS-506, 24 strains were found to be ESBLs positive, and 24 strains ESBLs negative. The result was consistent with that of double-disk synergy test. Among 102 strains of E.coli detected using VITEK GNS-506, 41 strains were found to be ESBLs positive. The result was consistent with that of double-disk synergy tests. 61 strains were found to be ESBLs negative detected using VITEK GNS-506. Among them, 19 strains were found to be ESBLs positive.Conclusion Detection ESBLs using VITEK-AMS has some limitations in our area. Simple and reliable method should be used more with indicates for detection of ESBLs suitable for routine screening.
【Key words】 beta-lactamases;Escheri chia coli;Klebsiella pneumoniae
自1983年德国首次报道产超广谱β -内酰胺酶（ESBLs）的臭鼻克雷伯菌以后，国内外不断有ESBLs流行情况的报道［1，2］，由于ESBLs可通过质粒传递给其他细菌，易造成医院感染的暴发流行，成为革兰阴性菌耐药的最危险因素之一。因此，临床微生物实验室选择简便、可靠的方法检测产ESBLs的菌株非常重要。近年来，越来越多的医院引进了VITEK-AMS，其专用药敏卡可以检测产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，我们就VITEK-AMS对ESBLs的检测与纸片协同试验结果作一比较，现报道如下。
材料和方法一、材料
1.菌株来源：为我院1999年6～12月临床分离的菌株，其中大肠埃希菌102株，肺炎克雷伯菌48株。
2.仪器和试剂：细菌鉴定和药敏试验使用生物梅里埃公司的VITEK-AMS，鉴定卡为GNI+，药敏卡为GNS-506，均为生物梅里埃公司产品。
3.药敏纸片：头孢噻肟(30 μg)，头孢他啶(30 μg)，氨曲南(30 μg)，购自浙江省军区后勤检疫所；头孢曲松(30 μg)，阿莫西林 /棒酸(奥格门汀 20 μg/10 μg)，购自生物梅里埃公司。
4.MH琼脂：购自浙江省军区后勤检疫所。
二、方法
1.细菌培养和鉴定：细菌分离培养按照《全国临床检验操作规程》进行，用VITEK-AMS专用卡GNI+鉴定结果。
2.VITEK-AMS检测ESBLs：采用GNS-506专用药敏卡，严格按说明书操作，在仪器专家系统的判断下，自动给出被测菌是否为产ESBLs菌株。
3.纸片协同试验：按文献报道［2，4］操作和判断结果。
结果1.用VITEK—AMS与纸片协同试验两种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷菌产ESBLs情况，结果表明，仪器检测的48株肺炎克雷伯菌中，24株显示ESBLs阳性，用纸片法检测也为阳性，两者结果一致；仪器检测的102株大肠埃希菌中，41株显示ESBLs阳性，纸片法也为阳性；而61株仪器报告ESBLs阴性菌株中，用纸片法检测19株为阳性，42株为阴性。
2.药敏试验结果：纸片协同试验检测为ESBLs阳性的60株大肠埃希菌对4种底物的耐药性比较见表1。
表1 纸片协同法检测为ESBLs阳性的60株大肠埃希菌
对4种底物的耐药性比较
| 抗生素 | 仪器法阳性 （41株） | 仪器法阴性 （19株） | χ2 | P值 | ||||
| R | I | S | R | I | S | |||
| 头孢噻肟 | 25 | 15 | 1 | 17 | 2 | 0 | 5.02 | ＜0.05 |
| 头孢他啶 | 4 | 1 | 36 | 3 | 4 | 12 | ＜3.84 | ＞0.05 |
| 氨曲南 | 7 | 21 | 13 | 13 | 4 | 2 | 15.4 | ＜0.005 |
| 头孢曲松 | 33 | 6 | 2 | 16 | 3 | 0 | ＜3.84 | ＞0.05 |
