应用全自动血培养仪提高血液、无菌体液培养阳性率
a:包括轻型链球菌、草绿色链球菌、坚忍链球菌各1株;b:包括催产克雷伯菌、中间肠杆菌、聚团肠杆菌、异型枸橼酸杆菌各1株;c:包括粘膜黄杆菌、洛菲不动杆菌、鲍曼不动杆菌、木糖氧化无色杆菌各1株;d:包括平滑念珠菌、土生念珠菌、罗伦特隐球菌各1株;e:包括星座链球菌3株、中间型链球菌2株、消化链球菌1株
2.血液、无菌体液细菌培养结果:1 000份标本中,有158份分离出细菌,其中149份有临床意义,阳性率为14.9%;有9份考虑为标本污染,占0.9%;还有40份标本仪器提示为阳性,但未分离出细菌,定为假阳性,占4.0%。血培养阳性率占11.0%,腹膜透析液培养的阳性率占3.6%,胸腹水、羊水和穿刺液的阳性率各占0.1%。
3.阳性检出时间:1996年11月~1997年6月从376份标本中分析了培养阳性的78株菌的检出时间,其中52.6%的细菌在24小时内检出,40%的链球菌和62.5%的真菌在48小时后检出,值得注意的是56.3%的假阳性是在48小时后报警的(表2)。
表2 血培养阳性检出时间(h)
| 菌名 | 菌株数 (n) | <24h | 24~48h | >48h | |||
| 阳性株 | 检出率 (%) | 阳性株 | 检出率 (%) | 阳性株 | 检出率 (%) | ||
| 葡萄球菌 | 27 | 18 | (66.7) | 7 | (25.9) | 2 | (7.4) |
| 链、肠球菌 | 10 | 4 | (40.0) | 2 | (20.0) | 4 | (40.0) |
| 肠杆菌科 | 13 | 11 | (84.6) | 0 | 2 | (15.4) | |
| 非发酵菌 | 1 | 0 | 1 | (100) | 0 | ||
| 真菌 | 8 | 1 | (12.5) | 2 | (25.0) | 5 | (62.5) |
| 污染菌 | 3 | 1 | (33.3) | 2 | (66.7) | 0 | |
| 假阳性 | 16 | 6 | (37.5) | 1 | (6.2) | 9 | (56.3) |
| 合计 | 78 | 41 | (52.6) | 15 | (19.2) | 22 | (28.2) |
为了提高血培养阳性率,缩短培养时间,本实验室采用BACTEC-9120进行振荡培养和检测,由于该系统是利用细菌的代谢产物CO2被感应器内的荧光物质吸收后激发出荧光,并每隔10分钟测试1次,经设定的程序自动进行计算、判读、记录生长曲线和报警,因此培养阳性率从常规培养法的10.8%提高到14.9%,24小时内的阳性检出率为52.6%,阴性报告时间从7天缩短到5天。此外我们还尝试将该系统用于腹膜透析液、羊水、骨髓等无菌体液的培养,腹膜透析液的培养阳性率高达29.8%。
近年由于抗菌药物的普遍使用及医学技术的发展,使败血症的致病菌种类有了较大变迁[2,3],条件致病菌所致败血症、真菌败血症及厌氧菌败血症等有增多的趋势。我们在1 000份血及无菌体液标本中共分离出149株菌,分布的范围很广,涉及43个菌种,其中除少数为致病菌(金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、伤寒沙门菌等)外,大多数为条件致病菌,占90.6%。血浆凝固酶阴性葡萄球菌导致的败血症有62例,占41.6%,有明显上升趋势,这些细菌的感染往往与侵袭性操作有关,该菌产生的粘质有利于细菌吸附在塑料上,也能干扰宿主的免疫应答[4]。
本研究显示65.7%的败血症继发于其他疾病,各种慢性疾病如肿瘤、慢性肾病、肝病及代谢性疾病等,由于免疫功能减退,使患者较容易受到感染而发生败血症,免疫抑制剂和广谱抗生素的应用,更加快了这一变化。
由于血细胞的代谢也能产生CO2,激发荧光,本仪器设定的程序虽可排除一般的血细胞呼吸干扰,但是在一些细胞质和量异常的情况下可出现偏差。我们分析了30例假阳性的病例,发现血液病病人的假阳性率较高。从表2可见56.3%的假阳性出现在48小时以上,而真阳性标本在24小时以内的阳性检出率为52.6%。但我们不能排除由于应用抗生素或培养条件不足所导致的分离培养假阴性,因此当仪器提示阳性,而分离培养阴性时,应转种巧克力平皿,置CO2环境内培养,有条件的最好做细菌L型的培养。如用BACTEC专用树脂瓶,更能起到中和抗生素,提高培养阳性率的作用[5-7]。
至于污染菌的判定,排除了专性致病菌外,须与临床联系,凡与临床症状和原发病灶的病原菌不符,两次培养未能证实同一细菌的才能定为污染菌。
参考文献1 生物-梅里埃.血液培养技术问题回顾.第五届VITEK学术会议论文集.1994,21-22.
2 周贵民,张军民.血培养方法研究进展.中华医学检验杂志,1996,19:331-333.
3 刘恭植.血培养研究进展.临床检验杂志,1996,14:48-50.
4 徐秀华.血液感染.见:王枢群,主编.医院感染学.重庆:科学技术文献出版社,1990,413-422.
5 Rohner P, Pepey B, Auckenthaler R, et al. Advantage of combining resin with lytic BACTEC blood culture media. J Clin Miocrobiol, 1997,10:2634-2638.
6 Cockerill Ⅲ FR, Reed GS, Hughes JG, et al. Clinical comparison of BACTEC 9240 plus aerobic/F resin bottles and the isolator aerobic culture system for detection of bloodstream infections. J Clin Miocrobiol, 1997,6:1469-1472.
7 许淑珍,张淑兰,陈力.Bactec 9120血培养系统检测细菌影响因素的探讨.中华医学检验杂志,1997,20:272-274.
