细胞培养三种染色法检测沙眼衣原体
| Temp | days of storage | |||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| 4°C 37°C -10°C -70°C Liq N2 | 14 5 14 | 9 0 13 15 | 8 0 10 | 6 8 | 4 | 4 14 | 2 | 0 13 15 |
3 讨论
临床上沙眼衣原体感染的病原学诊断,必须依靠实验室检查。虽然标本的直接涂片,可以检出部分样品的沙眼衣原体,但漏诊率较高。沙眼衣原体的细胞培养法敏感性约为80%~90%,极少有假阳性,是目前确诊衣原体感染的最可靠方法[3]。本研究用McCoy细胞培养临床标本后,再以3种染色法检测,其敏感度依次为,单抗免疫荧光法,Giemsa染色法及碘染色法。沙眼衣原体感染的初次培养有一定的漏诊率,在我们的研究里,首次阴性盲传一次后转为阳性者,占全部阳性病例的19.1%~27.0%,与王启操等报道相似[5],提示对初次培养阴性者进行盲传复检十分必要。
沙眼衣原体培养成功与否,标本的贮存温度及检测时间是关键之一。既往沙眼衣原体毒株有置-40°C温冰箱保存的报道[5],我们将15份阳性标本分别贮存于4°C、37°C、-10°C、-70°C和液氮中,结果显示,标本中衣原体的活力随贮存温度的升高和时间的延长而明显下降,即使在-70°C的条件下,标本的阳性率在7天内亦下降6.7%,但低于James等[6]报道的11%~20%。液氮可以长期保存标本,但费用高耗。目前,在-70°C超低温冰箱和液氮供给仍难以普及的情况下,临床标本采集后,应尽快进行细胞接种,以确保检测的准确性。
参考文献1 WHO.STD case management workbook,module one,The transmission and control of STD/HIV(Field test version),1994.9
2 Kluytmans J A J W,Goessens W H F G,Mouton J W,et al.Evaluation of clearview and magic lite tests,polymerase chain reaction,and cell culture for detection of chlamydia trachomatis in urogenital specimens.J Clin Microbiol,1993,31:3204
3 Setness P A.Chlamydial infections,Gaining control of a growing epidemic,Postgrad Med,1989,36:1300
4 王启操、张国威、何之志,等,泌尿生殖道沙眼衣原体分离培养方法探讨.中华皮肤科杂志,1996,29:198
5 张力、张晓楼、金秀英,等.沙眼衣原体TE-55株在DEAE -dextran处理的Hela-299细胞中原代及传代培养.中华流行病学杂志,1989,10:170
6 James B M,Max A C.Effect of swab type and storage temperature on the isolation of chlamydia trachomatis from clinical specimens.J Clin Microbiol,1985,22:865
