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酵母菌培养鉴定方法的比较

医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:42

为了综合判定酵母菌培养鉴定方法的优劣,我们采用常规鉴定法、生物梅里埃Vitek32-YBC鉴定卡和法国CHRO Mager念珠菌显色培养基培养鉴定法等三种方法对321株致病性酵母菌进行鉴定比较。 1 材料与方法

1.1 培养基 沙保弱培养基(沙保基)和手工鉴定培养基按常规自配,CHRO Mager念珠菌显色培养基(显色基)购自博赛公司,YBC鉴定卡为生物梅里埃公司产品。

1.2 标本 321株致病性酵母菌从748份痰、中段尿、粪、宫颈分泌物、血等临床标本中分离。

1.3 方法 每份标本同时划线接种沙保基和显色基,28°C培养每隔24 h观察一次,13天不生长判为阴性。

1.4 鉴定

1.4.1 手工鉴定法 沙保基上生长的菌落经涂片革兰染色确认为酵母菌孢子后,同时做血清芽管、尿素分解、菌膜及蔗糖发酵试验,芽管阳性为白色念珠菌,芽管阴性,菌膜、蔗糖阳性为热带念珠菌,其它情况作进一步生化鉴定。

1.4.2 YBC卡鉴定法 分离、染色同上,将菌液调至2.0麦氏单位,充满YBC卡后28°C孵育24 h,放入Vitek32分析,如未鉴定出继续孵育至48 h再上机分析,自动显示结果。

1.4.3 显色培养基鉴定法 在显色基上生长翠绿色菌落为白色念珠菌、兰灰色菌落为热带念珠菌,紫红色边缘模糊有微毛为克柔氏念珠菌,整个菌落显紫红色为光滑球拟酵母菌,白至紫色为其它念珠菌。

2 结果

2.1 两种培养基分离结果 真菌类在两种培养基上生长的阳性率相同,在沙保基上生长的霉菌如青霉菌、曲霉菌、镰刀菌、毛霉菌以及新型隐球菌等在显色基上均能生长。对细菌的抑菌率显色基强于沙保基,显色基上细菌生长率为1.1%,沙保基为9.9%。

2.2 三种方法鉴定差异 214株白色念珠菌三法鉴定无差异。手工法鉴定为热带念珠菌的67株菌中,58株显色基法和YBC卡也为热带念珠菌,另外9株显色法的结果为其它念珠菌,YBC卡鉴定其中5株为近平滑念珠菌,4株为季也蒙念珠菌。这9株菌的鉴定差异主要是因为出现了菌膜,因为在念珠菌的常规生化鉴定表中,仅有热带和克柔等念珠菌会出现菌膜。全部321株致病性酵母菌三种方法的鉴定结果见表1。

表1 321株致病酵母菌三种方法鉴定结果

菌名 手工法 显色法 YBC卡
白色念珠菌 214 214 214
热带念珠菌 67 58 58
光滑球拟酵母菌 20 20 20
近平滑念珠菌 6 6 11
季也蒙念珠菌 0 - 4
克柔氏念珠菌 3 3 3
酿酒酵母菌 0 - 3
新型隐球菌 2 - 2
异常汉逊酵母菌 0 - 2
葡萄牙念珠菌 0 - 2
红色酵母菌 1 1 1
伪热带念珠菌 0 - 1
其他* 8 19 0

*:表示用此法不能鉴定到种 -:表示用该法不能鉴定

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