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浓度梯度法用于耐甲氧苯西林葡萄球菌的检测

医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:43
关键词: 甲氧苯西林;葡萄球菌;抗药性;微生物;微生物敏感性试验 【摘要】 目的 尝试用浓度梯度法(如Etest法)对耐甲氧苯西林葡萄球菌(MRS)进行检测,并验证其精确性、连续性、稳定性。方法 应用Etest法苯唑西林和甲氧苯西林试条检测58株临床分离葡萄球菌的耐药率,并对其中29株菌采用Etest法和Microscan法对青霉素、苯唑西林、万古霉素等6种抗生素进行最低抑菌浓度(MIC)结果的比较。结果 58株葡萄球菌中,Etest法对MRS的总检出率为83%。如果Etest法作为参考方法,则29株菌的MIC对比中Microscan法的判别误差为苯唑西林13.0%,庆大霉素3.4%,氯林可霉素27.6%;两种方法对青霉素和环丙氟哌酸无明显误差。尽管两法对万古霉素无判别误差,但Microscan法有较明显的低MIC值趋势。结论 Etest法的精确性、连续性和稳定性使其可作为临床实验室检测MRS的常规药敏方法的重要补充。 Detection of methicillin resistant Staphylococcus with Etest strips Xiong Jianhui, Laboratories, First Municipal People′s Hospital of Guangzhou, Guangzhou 510180 【Abstract】 Objective To study detection of methicillin resistant Staphylococcus(MRS) with Etest and comparison of Etest vs. Microscan MIC systems in susceptibility of Staphylococcus.Methods 58 clinical Staphylococcus isolates were tested with Etest oxacillin, and methicillin strips. Among them, 29 were compared with both Etest and microscan MIC methods for penicillin, oxacillin, vancomycin, ciprofloxacin, gentamycin and clindamycin.Results The total MRS detection rate by Etest was 83% in the 58 strains. For comparison, if Etest was used as the reference method, the interpretation discrepancies found for microscan were: 13% for oxacillin, 3.4% for gentamycin, and 27.6% for clindamycin. Both systems had comparable results for penicillin and ciprofloxacin. There was a clear tendency towards lower MICs for vancomycin by microscan but no category errors occurred.Conclusion Etest as an accurate, continuous and stable MIC method may be an useful supplement and confirmation tool for detection of MRS with routine susceptibility tests in clinical labs. 【Key words】 Methicillin Staphylococcus Drug resistance, microbial Microbial sensitivity tests 耐甲氧苯西林葡萄球菌(MRS)的测定是临床微生物实验室最常用的检验项目之一。1997年版美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定临床微生物实验室检测MRS的条件,其中特别提到加入适量的NaCl和对凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)延长培养时间有助于对MRS的检出。纸片法和自动化方法是最常用的药敏方法,但由于该菌种的生物复杂性,有时还要增加其他的实验方法如苯唑西林的平板筛选法才能检出MRS。8年前问世的浓度梯度法(如Etest法)被认为是检测MRS的良好替补方法1~4],为加深对此方法的了解,本室尝试用Etest法进行MRS的检测,并对部分菌株用Etest法和Microscan法(用自动化分析仪、微量肉汤法进行药敏鉴定)对6种抗生素最低抑菌浓度(MIC)测定结果进行比较。 材料与方法

一、材料

1.实验菌株:1996年7~10月本院住院和门诊病人标本分离出的葡萄球菌共58株,其中金黄色葡萄球菌21株,CNS37株。质控菌株用金黄色葡萄球菌ATCC 29213和粪肠球菌ATCC 29212。

2.Etest法试条:瑞典AB BIODISK公司生产,包括青霉素、甲氧苯西林、苯唑西林、万古霉素、庆大

附表 Etest法和Microscar法测定葡萄球菌的药敏效果(μg/ml)
菌号 菌名 Etest法MIC Microscan法折点
PG OX VA CI GM CM PG OX VA CI GM CM
20 sau 96 256 2 32 256 256 >8 >2 <2 >2 >8 >2
21 sau 48 256 3 32 256 0.125 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
28 sau 256 256 3 32 256 0.125 >8 >2 <2 >2 >8 <0.125
31 sau 256 256 1.5 32 256 256 >8 >2 <2 >2 >8 >2
44 sau 48 256 1.5 32 256 0.125 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
66 sau 8 2 3 0.25 1 0.25 >8 >2 <2 <1 4 >2
70 sau 4 12 3 32 12 0.125 >8 >2 <2 >2 >8 >2
71 sau 32 256 3 32 256 0.25 >8 >2 <2 >2 >8 2
76 sau 64 256 2 32 256 0.125 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
77 sau 3 1.5 2 0.25 0.38 0.19 >8 <0.5 <2 <1 2 <0.25
01 sep 0.5 256 2 32 256 0.25 >8 >2 <2 >2 >8 >2
30 sep 3 64 3 6 256 256 >8 >2 <2 >2 >8 >2
35 sep 1 6 3 32 16 4 0.5 >2 <2 >2 >8 <0.25
73 sep 2 12 3 16 0.38 0.19 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
74 sep 256 256 4 32 256 0.19 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
78 sep 3 2 3 0.13 0.38 0.125 >8 <0.5 <2 <1 4 <0.25
159s sep 256 256 4 32 256 0.25 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
25 shl 256 256 3 32 256 0.19 >8 >2 4 >2 >8 <0.25
27 shl 64 256 3 32 256 256 >8 >2 <2 >2 >8 >2
29 shl 1.5 3 3 0.19 0.25 0.125 0.5 <0.5 <2 <1 <1 <0.25
33 shl 256 256 3 32 256 256 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
34 shl 6 6 3 32 256 2 8 <0.5 <2 >2 >8 <0.25
37 shl 24 256 2 0.19 16 0.19 >8 >2 <2 <1 >8 <0.25
39 shl 32 64 2 32 32 0.125 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
40 shl 24 256 2 1.5 16 0.125 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
41 shl 12 256 3 12 256 0.38 8 <0.5 <2 >2 >8 0.5
67 shl 256 256 6 32 256 0.25 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
75 shl 256 256 3 32 256 0.19 >8 >2 <2 >2 >8 <0.25
72 s-- 256 256 4 32 256 0.25 4 >2 <2 >2 >8 1
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