关键词：
肠球菌；耐药性；微生物；电泳
【摘要】 目的
研究临床分离的肠球菌对常用抗生素的耐药性及肠球菌与感染性疾病的关系。
方法
应用纸片扩散法检测从临床标本中分离的311株肠球菌的耐药性；脉冲场凝胶电泳（PFGE）对细菌分型；病例回顾性分析。
结果
肠球菌对临床常用的15种抗生素的耐药率以万古霉素最低；其次为氨苄西林/舒巴坦耐药率为17.4%；亚胺硫霉素耐药率为18.3%。粪肠球菌与屎肠球菌对抗生素的耐药率有明显差异。应用PFGE法将粪肠球菌分为A型及亚型、B型、C型及亚型、D型，屎肠球菌分为A、B、C型。
结论
肠球菌对临床常用的15种抗生素的敏感性以万古霉素最敏感。肠球菌引起的不同系统感染，以泌尿系统最常见。PFGE对肠球菌感染流行监测是一个有力的工具。
Enterococcus spp resistance and typing by pulsed-fpield gel electrophoresis.
Zhang qunzhi, Zhou Huiping. Department of Clinical Laboratory, 1st Hospital, Beijing Medical University, Beijing 100034 【
Abstract】 Objective
To study Infections of Enterococcus spp and its resistance to antibiotics in 4 general hospitals.
Methods
Enterococcus resistance was tested using K-B methods. Organisms were indentified by API system and PFGE. The relationship between Enterococcus and infectious diseases was analysed according to clinical case.
Results
The resistant rate of Enterococcus against vanomycin was 0 in 15 antibiotics The resistant rate of ampicillin-sulbactum was 17.4%, the next and of imipenem 18.3% the third in ranking. The incidence rate of urinary infections caused by Enterococcus was 42.3%. Enterococcus faecalis was divided into type A and subtype A, type B,type C and subtype C and Enterococcus faecium into type A, B and C by PFGE.
Conclusion
Enterococcus was most susceptible to vancomycin among the 15 antibiotics. The resistant rate of Enterococcus faecium was higher than that of Enterococcus faecalis. PFGE was useful in epidemiological monitoring etiology of infectious disease. 【
Key words】
Enterococcus Drug resistance, microbal Electrophoresis 肠球菌属是人体严重感染的病原菌之一，可引起人体多系统感染性疾病。对免疫力低下者可致严重感染，如心内膜炎、菌血症等。肠球菌感染的疾病逐年增加，在引起医院内感染因素中占第四位
［1］。由于肠球菌对抗生素的耐药性增加，以及产β-内酰胺酶的肠球菌及耐高浓度氨基糖甙类抗生素肠球菌的出现，特别是近年出现的耐万古霉素的肠球菌给临床治疗造成困难，因此引起广泛重视。我们研究了肠球菌对常用抗生素的耐药性及肠球菌与感染性疾病的关系。 材料和方法
一、材料
1.菌株：(1)实验用临床菌株：实验所用菌株是1995年11月至1996年11月由北京医科大学第一医院、积水潭医院、北京医院、人民医院(分别以A、B、C、D表示)血、尿、痰、咽拭子、胆汁、宫腔分泌物、胸水、腹水、脑脊液等临床标本中分离311株肠球菌。(2)标准菌株：ATCC 25923（金黄色葡萄球菌）、ATCC 29212（粪肠球菌）购自卫生部临床检验中心。
2.抗生素纸片：氨苄西林、青霉素、头孢唑啉、丁胺卡那霉素、庆大霉素、氧氟沙星、环丙沙星、红霉素、氟哌酸、苯唑西林、利福平、哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦，购自中国药品生物制品检定所。亚胺硫霉素、万古霉素购自BBL公司。
3.主要试剂： API-20Strep 快速鉴定试剂盒：购自bioMeireux公司；MH培养基：购自中国生物制品检定所；Genepath Groupl Reagent Kit 购自Bid Rad 公司，批号310-0002 。
4.主要实验仪器：(1) 低温高速冷冻离心机HERMLE Z383K 德国BMH公司产品；(2) 多点接种仪I型，中国科学院计算机新电脑工程公司及北京医科大学联合生产；(3) CHEF-DRIII脉冲场凝胶电泳仪及配套设施，美国Bid-Rad产品。
二、方法
1.菌株鉴定：应用API-20 Strep鉴定系列，操作及结果判读按试剂盒说明完成。
2.抗生素敏感实验(纸片扩散法)：按美国临床实验室标准化委员会1995年版标准操作和判断结果。
3.染色体DNA脉冲场凝胶电泳(PFGE)：按试剂盒说明进行DNA包埋琼脂块的制备；电泳的选择程序为6Enc,14℃，20小时；用溴化乙啶染色、照相。
结果判断标准［2］：(1)酶切后图谱完全一致定为同一型如A型。(2)酶切后图谱与A型比较有1～3条带不同者，定为亚型(如A1.....An)。(3)酶切后图谱与A型比较如有3条以上带不同者则定为另一基因型如B、C、D型等。
4.统计学分析：列联表确切概率法，在SAS统计软件包上完成。
结果
1.四家综合医院肠球菌属分布情况：在311株肠球菌中，粪肠球菌占68.5%，屎肠球菌占21.9%，卡氏肠球菌5.1%，坚韧肠球菌占2.3％，鸟肠球菌占2.3%。
