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玻片法凝固酶阳性的葡萄球菌再鉴定

医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:46

为进一步弄清玻片法对葡萄球菌血浆凝固酶试验鉴定的准确性,我们收集了玻片法结果阳性的葡萄球菌118株,按Kloos等[1]分类方法进行详细鉴定与分类,结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 菌株来源 菌株分离于1996年8月~1997年12月我院住院及门诊患者各类标本中,计118株。标准菌株ATCC 25923由天坛生物制品检定所提供。 1.2 菌种鉴定方法 将经玻片法凝固酶试验鉴定的、经纯化培养后保存于琼脂斜面的“金葡菌”118株,传代培养,按照Kloos等[1]方法再鉴定。 2 结果 2.1 菌种鉴定结果 金黄色葡萄球菌23株,中间型葡萄球菌28株,表皮葡萄球菌19株,溶血葡萄球菌15株,里昂葡萄球菌9株,人葡萄球菌7株,耳葡萄球菌7株,华纳葡萄球菌3株,其余是腐生葡萄球菌和柯氏葡萄球菌7株,共10种。 2.2 玻片法凝固酶重复试验结果 在限时操作的10秒种内,呈阳性反应者,23株金黄色葡萄球菌中有22株,28株中间型葡萄球菌中有25株,阳性反应准确率为92.16%(47/51)。 2.3 菌种与样品来源关系的观察,见表1。 表1 不同临床标本葡萄球菌的分离情况

株数 标 本 来 源
伤口分泌物 耳分泌物 尿道分泌物 血液 尿液 其它
金黄色葡萄球菌 23 0 17 2 1 0 1 2
中间型葡萄球菌 28 2 10 7 1 1 7 0
表皮葡萄球菌 19 1 0 0 2 1 14 1
溶血葡萄球菌 15 8 1 0 1 1 2 2
里昂葡萄球菌 9 0 0 0 5 0 4 0
其它型葡萄球菌 24 0 0 0 8 1 15 0
合 计 118 11 28 9 18 4 43 5
2.4 β-内酰胺酶测试结果 采用酸测定法。同时用大肠埃希菌ATCC 35218及金黄色葡萄球菌ATCC 25923为质控菌株。118株葡萄球菌中,产酶株有61株,占51.69%。在产酶株中,以中间型葡萄球菌产酶率最高,占85.71%(24/28)。 2.5 抗生素敏感试验结果 10种葡萄球菌对12种抗生素耐药性相差不大,除对万古霉素、丁胺卡那霉素以及加酶抑制剂的抗生素敏感外,对其余抗生素敏感性均较低。 3 讨论

为防止玻片法检测血浆凝固酶试验假阳性反应,必须严格按《全国临床检验操作规程》[2]进行操作,即在10秒内完成此试验。本室以前将此实验延时1~2分钟观察,致使假阳性率高达56.78%(67/118)。同时,为防止假阳性反应,还必须做试管法血浆凝固酶试验,以免“游离”的凝固酶漏检。

凝固酶阳性的葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌。因此凝固酶试验阳性者不能定为金黄色葡萄球菌,必须再进行有关生化试验如耐热DNA酶、β-半乳糖苷酶,方可正确鉴定。

参考文献

1 Kloos W E,Lambe D W.Staphylococcus.In:Albert B.ed,Manual of Clinical microbiol.5 th ed.Washington:American society for microbol,1991.222

2 叶应妩,王毓三主编.全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997.553~569

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