医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:47

b －溶血链球菌生长也会有溶血现象；6. 严格需氧菌，如铜绿假单胞菌和酵母菌，在肉汤与空气分界面生长旺盛，肉汤表面形成菌膜层； 7. 革兰阳性芽胞杆菌属或真菌将导致溶血性肉汤及在肉汤表面有清楚的小薄膜形成。对手工血培养系统，掌握这些微生物生长可视信号尤为重要，一旦出现生长信号，立即革兰染色检查微生物的存在情况。做直接的非标准的抗生素敏感试验，能节约宝贵的时间，方法将一无菌拭子浸入混浊的肉汤液，挤出过多的液体，参照标准方法涂布Muller-Hinton琼脂，根据革兰染色特性，选择适当的抗生素纸片，培养6h ~ 8h后，经常观察直接药敏，若有药敏结果及时报告，约95%的直接药敏结果与标准药敏结果一致。

可用吸液管传种，注意吸取明显的生长物，如沉淀物或颗粒物，可用吸液管轻轻地吸取肉汤的深处，让管尖从瓶底移出肉汤表面。如果证实患者抽血前已用抗生素，在传种的培养皿上，滴上阳性肉汤，停几分钟，然后在分区划线，这会使抗生素吸收到琼脂内，划线区内的细菌易生长。新霉素（neomycin）血平皿可作厌氧培养基。 手工培养法，无论何时发现肉汤混浊，一定要作传种培养，在孵育期间，大多数实验室也会例行公事地传种肉汤。在培养过程中血培养阳性会随时出现，因此合理地传种方案在培养1,3,5天及7天后进行。7天终点传种通常不作，除非肉汤混浊。 血培养阳性革兰染色未发现细菌，可用2%石碳酸复红染色。

如何提高血培养阳性率的操作规范 采血指征： 对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗时，应及时进行血液培养，患者出现以下体症时可作为采集血培养的重要指征: 1. 发热（³38°C）或低温（£36°C）。 2. 寒战。 3. 白细胞增多（计数大于10，000´10⁹/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞）。 4. 粒细胞减少（成熟的多核白细胞小于1000´10⁹/L）。 5. 血小板减少。 6. 皮肤粘膜出血。 7. 昏迷。 8. 多器官衰竭。 或同时具备上述几种体症时应采血培养。在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，很少培养出细菌, 应该补充尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁或以下的幼儿）一般出现于门诊，常伴有明显发热（³38.5°C）和白细胞增多（总数³20，000x10⁹/L）。老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要信号。

采血量: 对从菌血症或真菌菌血症患者血培养中获得微生物, 每个培养瓶抽取的血量是唯一重要的变量。当培养的血量从2ml增加到20ml时，血培养的阳性率增加30%~50%，因为培养的血液量增加 1ml, 阳性率增加3%~5%。

用静脉穿刺获得的血量，成人和儿童不同。儿童，特别是新生儿很难获得大量的血液，对婴幼儿和儿童，一般静脉采血1ml~5ml用于血培养，当细菌浓度足够高时，血液少于1ml也足以检测出菌血症。标本量大于1ml, 细菌量也增加，对于感染的儿童每毫升血液比成人有更多的微生物。 对于成人血培养的标本量10ml，血液和肉汤的比一般推荐为1：5至1：10。几乎所有现代的血培养系统每瓶加入血液量均为10ml。虽然静脉采血30ml可增加细菌量，但这不太切合实际，这很容易造成医院获得性贫血。

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