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幽门螺杆菌改良无血培养基的研制

医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:47
The number of Hp positive from gastric mucosas with BHIA and BHI-EA in difference time
Medium positive number Total
24 h 48 h 72 h 96 h
BHIA BHI-EA 1 12 30 38 17 6 4 1 52 57
2.2 两种培养基上胃标本Hp分离阳性率比较 分别对82例不同胃病患者(胃癌9例,胃炎16例,胃溃疡23例,十二脂肠溃疡24例,其它胃疾病10例)胃粘膜标本进行分离培养。结果在BHIA上阳性分离率为63%(52/82),而在BHI-EA上阳性率为70%(57/82)。培养结果表明,BHIA与BHI-EA对不同消化道疾病患者胃粘膜的Hp分离阳性率基本一致,BHI-EA稍高于BHIA,无统计学差异(P>0.05)。 2.3 两种培养基上Hp纯培养生长速度的比较 所有Hp分离株在此两种培养基上均能顺利生长,但生长速度明显不同,分别取前述57例阳性标本的分离菌株进行纯培养。在BHI-EA上12 h即有4株菌长出肉眼可见菌落,24 h内阳性结果为41例,阳性率为72%(41/57)。而BHIA上12 h内无明显菌落出现,直到24 h才有8株菌株出现,阳性率仅为14%(8/57),显著低于BHI-EA组(P<0.01)。 3 讨论

最近几年报道的针对Hp培养的无血培养基基本解决了应用含血培养基易污染的问题。但其培养速度仍较慢,我们采用的改良无血培养基充分解决了这一问题,在此培养基中,我们加入了相当于常规卵黄培养基中两倍的卵黄量,同时加入适量的胰蛋白胨成份,充分满足Hp生长营养需求,有效地刺激其生长,此外加入可溶性淀粉可吸附标本中有毒物质及Hp生长的代谢产物,保证Hp处于有利的生长环境。由实验结果可以得出,改良卵黄培养基能大大提高Hp的生长速度从而较大程度的节省培养时间,而且各项生物学性状均很典型,完全能满足临床诊断及Hp的研究所需,是一种实用的Hp培养方法。

幽门螺杆菌作为人胃内定居菌,对营养成分、气体条件等均有较严格的要求,使其在体外培养中受到很多因素的影响,因此培养基在制备过程中应严格控制pH值和各种成份的含量,特别是抗生素浓度及葡萄糖的含量。此外,由于Hp生长需要一定湿度条件,故在培养基倾倒平板后,应密封放4°C冰箱待用,放置时间不宜超过两周,保证Hp在新鲜培养基中有一最佳生长环境。另外,由于此培养基能有效的促进Hp生长,故在培养过程中应掌握好时间以防生长过度导致细菌球性变。

参考文献

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3 Hirata I,Itoh T,Masubuchi N,et al.Isoaltion identification and quantitative culture of Helicobacter pylori from gastric mucosa.Nippon Rinsho,1993,51:3170~3175

4 牟兆钦,尹秀云,李富裕,等.用无血脑心浸液卵黄琼脂培养基分离培养幽门螺杆菌的研究.军事医学科学院院刊,1995,19(1):63

5 吴开宇,吴平,潘秀珍,等.一种用于幽门螺杆菌培养和菌种保存的培养基——卵黄培养基.微生物学通报,1992,19(2):112

6 周殿元,等主编.幽门螺杆菌感染的基础与临床.北京:中国科技出版社,1997.290

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