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变应性鼻炎患者鼻腔灌洗液中白细胞介素5、嗜酸细胞阳离子蛋白水平的动态观察

医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:48

嗜酸细胞阳离子蛋白(eosinophil cation protein, ECP)。白细胞介素5(IL-5)是变应性鼻炎(AR)炎症形成过程中重要的炎症介质。是反映气道炎症活动的指标之一〔1〕。本实验以鼻部变应原激发试验(NAC)前、后24h共9个时相鼻腔灌洗液中ECP、IL-5浓度为指标,观察并比较ECP、IL-5在AR发病的病理、生理过程中的作用。评价鼻灌洗液分析在AR研究中的作用。 材料与方法

病例和对照:常年性变应性鼻炎(PAR)患者12例,男7例、女5例,平均年龄38.7岁,病程2~22年。未进行过免疫治疗,在受检前两天停用与治疗变应性疾病有关的所有药物(使用长效肾上腺皮质激素和/或息斯敏的患者不做为实验对象)。健康对照10例,男4例、女6例,平均年龄30.7岁,无个人和家族过敏史,大便虫卵检查阴性,近期无任何服药史。

实验方法:AR用户尘螨变应原,对照组用混合变应原(均由中国协和医科大学北京协和医院变态反应科提供)。原液作NAC,在NAC前和后的0.5、1、2、4、8、12、24h用清洁玻璃管分别收集1次生理盐水灌洗鼻腔的灌洗液(5ml)。20~28℃室温静止沉淀30~60min,4℃ 4000r/min离心10min,取其上清液,-70℃保存待测。其沉淀物留作EOS(嗜酸性粒细胞)计数。

IL-5浓度测定采用ELISA方法,IL-5试剂盒由美国Biousoure公司提供,灵敏度<4pg/ml,测定范围4~750pg/ml,操作按说明书进行。ECP测定采用荧光免疫法,用Pharmacia CAP system (Cabi Pharmacia,瑞典),灵敏度2μg/L,测定范围2~200μg/L,操作按说明书进行。EOS计数:将鼻灌洗液离心后的沉淀物涂于载玻片上,送本院检验科采用伊红黄甲醇-亚甲蓝甲醇染色,把两张玻片的EOS数相加即为一个时相EOS的绝对计数。统计处理采用t检验、秩和检验和直线相关分析。

结果和讨论

健康对照组NAC前、后24h的IL-5浓度始终保持一较低水平(4.02~6.53pg/ml)。各时相间差异也无显著性(P>0.05);ECP水平均在20μg/L以下;EOS均为阴性。而AR组在NAC前IL-5为9.62±4.23pg/ml,NAC后约5min出现鼻部症状,0.5h IL-5水平迅速升高,1h达高峰,2h迅速下降,4h有7例(58.33%)再次出现鼻部症状,IL-5也再次迅速上升,并持续升高,24h达最高值。ECP在NAC前为可检测水平,NAC后迅速上升,1h达高峰,随后又急速下降,8h再次升高,24h达最高值。

IL-5、ECP、EOS的水平与AR患者的症状呈正相关;AR组IL-5与ECP、EOS均呈显著相关(r=0.73、0.56,P<0.05),ECP与EOS间呈现一定的相关趋势(r=0.35,P>0.05)。

Walker等认为,IL-5水平升高是变应性疾病的共同特征。本结果表明,AR患者的症状发作与鼻分泌物中IL-5升高有关。AR病人鼻分泌物中的ECP较血清ECP更能直接反映EOS的激活和鼻腔炎症的活动〔2〕。我们的研究发现,AR病人灌洗鼻腔的生理盐水中ECP在整个过程中均显著高于对照组(P<0.0001)。由此说明,鼻分泌物ECP水平可反映AR炎症的活动情况,是随着病情变化而波动。

以鼻灌洗液为标本定量测定了在AR发病过程最初24h的IL-5、ECP水平。结果表明,其在鼻腔灌洗液中的浓度可以反映AR的严重程度,且较传统的鼻粘膜活检安全、简便、实用,病人易于接受,并不受病情变化影响,适于临床动态观察患者病情变化。

参考文献

1,中华耳鼻咽喉科学会.变应性鼻炎诊断标准及疗效评定标准(1997年修订,海口).中华耳鼻咽喉科杂志,1998,33(3):134-135.

2,Svensson C. Albumin, bradykinins and eosinophil cationic protein on the nasal mucosal surface in patients with hay fever during natural allergen exposure. J Allergy Clin Immunol, 1990, 85:828-833.

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