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败血症患儿厌氧血培养639例

医学检验信息网 检验医学 2007-2-26 16:16:36
关键词: 细菌;厌氧;败血症 【摘要】 目的 开展败血症患儿厌氧血培养,提高病原菌检出率。并分析患儿厌氧菌败血症的主要特点。方法 应用API 20A鉴定系统对厌氧血培养分离的厌氧菌种进行鉴定。结果 639例败血症患儿中,厌氧菌单独阳性31例(4.8%),需氧菌单独阳性44例(6.9%),两者同时阳性20例 (3.1% )。合计厌氧菌阳性检出率为8.0%(51/639)。脆弱类杆菌致患儿厌氧菌败血症12例。结论 开展小儿厌氧血培养可提高败血症的病原菌阳性检出率及临床诊治水平;易合并肺炎、支气管肺炎和高胆红素血症,是厌氧菌败血症患儿的两个主要特点。 Anaerobic blood culture in 639 children. Dong Qinyuan. Department of Clinical Laboratory, shanghai Children′s hospital, Shanghai 200040 【AbstractObjective To detect the pathogen component and analyze the major characteristics of children′s anaerobic septicemia.Methods Anaerobes isolated from anaerobic blood culture were identified using API system. Statistical analysis of the complications of anaerobic septicemia was made.Results In anaerobic culture of blood samples of 639 children, 31 (4.8%)showed anaerobe positive results, 44 (6.9%) aerobe positive, 20 (3.1%) both positive. the total detection rate of positive anaerobe was 8.0% (51/639). B.fragilis was the main infective bacterium of anaerobic septicemia in children (12 cases).Conclusion Pneumonia, bronchitis (58.8%) and hyperbilirubinemia are the complications of children′s anaerobic septicemia. Anaerobic blood culture can improve the positive pathogenic detection rate of septicemia and the level of clinical diagnosis and treatment. 【Key words 】 Bacteria, anaerobic Blood culture Septicemia 国内迄今在败血症患儿中还未广泛开展厌氧菌血培养检测。为明确小儿厌氧菌败血症的病原学组成及检出率,我们于1993年9月24日~1996年12月5日,取临床诊断为败血症或疑似厌氧菌败血症的部分住院患儿639份血标本做厌氧血培养,现报道如下。 材料和方法

一、材料

1.厌氧培养箱:DY-2型厌氧箱为义乌冷冻机总厂产品,操作按使用说明书进行。

2.厌氧肉汤增菌瓶:由上海生物制品研究所制的厌氧菌液体培养基为基础液配置,因内含刃天青指示剂,若瓶内液体呈淡红色示有氧气,应弃之不用。

3.厌氧血琼脂平板:由上海生物制品研究所制的厌氧菌琼脂干粉添加维生素K1、氯化血红素及脱纤维羊血制成。平板必须先置厌氧缸18~24小时经预还原后或新鲜配置才可使用。

4.鉴定用试剂盒: API 20A系统及附加鉴定试剂由法国生物-梅里埃公司制。以20个生化测定(吲哚、脲素、葡萄糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、柳糖、木糖、阿拉伯糖、明胶、七叶灵、甘油、纤维二糖、甘露糖、松叁糖、棉子糖、山梨醇、鼠梨醇和海藻糖),加上触酶和3个形态特征(是否生孢子、革兰染色和是否球状),或若干补充试验,就可对厌氧菌做菌种鉴定。

二、方法

1.标本采集:选临床诊断败血症或疑似厌氧菌败血症的部分住院患儿639例,最小年龄2天,最大12岁,其中新生儿209例。用灭菌针筒抽取患儿静脉血8 ml(必须连针头一起拔出,排尽针筒内空气千万不能带入空气),注入厌氧肉汤增菌瓶,立即送检。

2.分离鉴定: 厌氧肉汤增菌瓶置35℃培养7~10天,3天后每天肉眼观察,如见瓶内混浊等异常变化,移种厌氧血琼脂平板和普通血琼脂平板各一只,分别置厌氧和需氧培养。厌氧血琼脂平板经35℃厌氧培养2天后,若有细菌生长,挑取平板内一种或多种形态的菌落分别做染色镜检、耐氧试验和纯种分离。纯种分离培养2天后,取耐氧试验不生长的专性厌氧菌,应用API 20A鉴定系统或参考文献[1]做出厌氧菌菌种的鉴定。取耐氧试验生长的需氧菌(兼性菌)或普通血琼脂平板35℃培养18~24小时后生长的一种或多种需氧菌菌落,按常规方法做需氧菌菌种的鉴定。

结果

1.639例败血症患儿血标本经厌氧血培养后,单独分离到厌氧菌者计31例(4.8%),单独分离到需氧菌者计44例(6.9%),同时分离到厌氧菌和需氧菌者计20例(3.1%)。累计计算,厌氧血培养厌氧菌阳性检出率为8.0%(51/639),需氧菌阳性检出率为10.0%(64/639),细菌总检出率为14.9%(95/639)。结果见表1。

表1可见,639例厌氧血培养共分离到细菌115株,其中厌氧菌52株,需氧菌64株。52株厌氧菌菌株分类归9个属,计19个种,脆弱类杆菌(bacteroides fragilis)有12株,占分离厌氧菌总数的23%(12/52)。

2.209例新生儿血标本检出厌氧菌17例,阳性检出率为8.1%(17/209)。

3.51例确诊厌氧菌感染的败血症患儿中,临床合并症主要为肺炎、支气管肺炎30例(59%);高胆红素血症13例(26%);肠炎及腹泻病12例(24%);新生儿黄疸10例(20%);贫血

10例(20%);休克8例(16%);新生儿脐炎4例(8%);骨髓炎、肾病综合症、传染性单核细胞增多症及营养不良各2例;化脓

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