MRSA━医院中的严重问题
8. 结论
(1) MRSA是全球性医院中一个严重的问题，其严重性更因某些MRSA菌株继续突变使金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性下降而变得更为突出，因而极需采用准确的方法监测MRSA与VRSA的发生率，更需开发新的安全有效的抗MRSA感染与抗VRSA感染的抗菌药物。
(2) 在不同国家与地区中金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药率存在着很大的差异，这除了与所用敏感试验方法、测试条件和监测研究的质控等影响因素有关外，与某些国家和地区所收集的菌株来自不同比例的院内感染与社区感染患者也可能有关。中国BRSSG(2000～2001)的监测结果表明MRSA发生率在HAI病人中高达89.2%,
显著高于CAI病人中MRSA的发生率30.2%。这个发现可用来解释某些国家或地区MRSA发生率较高是否可能因HAI病人所占比例较高之故。
补 充： 什么是聚合酶链反应（PCR）技术？PCR是在体外由酶促合成特异DNA片段的一种新方法。在反应液中含有模板DNA、人工合成的目的片段的5′端和3′端PCR引物、合成DNA的四种脱氧核苷酸底物（dNTP）、一种耐热的DNA聚合酶（Taq酶），以及含各种离子的缓冲液。此反应体系由高温变性、低温复性及适温延伸等步骤共同组成一个周期，然后反复循环进行，使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是，待扩增的模板DNA在94℃高温下解链成为单链DNA；低温复性时人工合成的两个寡聚核苷酸引物分别与目的片段两条链的两端互补结合；在72℃时Taq酶可将dNTP从引物3′端开始掺入，沿模板DNA5′→3′方向延伸，合成一条新的互补链。由于每一周期所产生的新DNA链均能成为下一循环的模板，所以PCR产物以指数方式增加，经过25~30个周期后，一般可扩增至106~107。PCR技术由于有操作简便、省时间、特异性及敏感性均较高等特点，在PCR反应的各种成分中，模板DNA和引物是两个重要因素，虽然PCR敏感性很高，可以检测微量DNA的用量，以不低于0.1μg为宜。模板DNA的纯度要求不是很严格，但不能混有任何蛋白酶、核酸酶及Taq酶抑制剂。引物是决定PCR结果的关键，引物长度以15~30个碱基为宜；（G+C）约占总碱基中的50%；两个引物之间不应发生互补；应尽量减少重复的碱基，特别是在3′端。PCR可用于扩增DNA或RNA。在扩增RNA时必须先用反转录酶合成cDNA第一链，然后进行PCT扩增，这种方法称为逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）。目前PCR技术在肿瘤研究中也得到广泛的应用。例如从肿瘤细胞提取基因组DNA然后用设计好的对某个基因特异的OCR引物，如p53基因第5~8外显子的引物，进行PCR扩增，然后用单链DNA构型多态性（SSCP）分析技术或直接DNA测序技术，研究p53基因的点突变。RT-PCR技术广泛应用于检测某个癌基因、抑癌基因或其他肿瘤相关基因的过度表达或低表达。（右图为PCR仪）
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