显色培养基在临床快速检测念珠菌的应用
我们利用念珠菌显色培养基,可以选择性分离念珠菌,并同时对白色念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌做出鉴定。其结果快速、准确、方法简便易行,现介绍如下。 一、材料和方法
1.菌株来源:1997年11月~1999年1月,我们从住院患者痰液标本分离出59株,阴道分泌物45株,咽拭子13株,大便标本9株,共计126株念珠菌。
2.念珠菌培养基:由河南郑州博赛科技有限责任公司提供。
3.沙保琼脂培养基:由浙江省军区卫生防疫站生产提供。
4.试验方法:(1)将23.85 g念珠菌显色培养基干粉,用150 ml无菌蒸馏水将干粉缓慢倒入无菌蒸馏水瓶中,加热溶解煮沸后,待冷却约50℃时,倾入至灭菌直径为4 mm的培养皿中,避光贮存冰箱里。在该培养基上白色念珠菌为绿色、热带念珠菌为蓝色、克柔念珠菌为粉红色,白至粉色为其他念珠菌。(2)将临床上痰液、咽拭子、阴道分泌物、大便标本平行划线接种念珠菌显色培养基和沙保培养基内,经35℃培养24~48小时,对3种念珠菌在显色培养基呈现特有的不同菌落的颜色做出判断,经玉米吐温琼脂培养基、芽管、尿素酶和酚氧化酶检测及12种碳源同化试验,将126株念珠菌鉴定到种。
二、结果1.用念珠菌显色培养基和沙保培养基,对3种念珠菌同时平行接种进行生长试验比较。结果经χ2检验,沙保培养基对白色念珠菌和热带念珠菌差异有显著意义P<0.01和P<0.05,而克柔念珠菌对这两种培养基差异无显著意义P>0.5,结果见表1。
表1 两种培养基对126株念珠菌在48h生长情况(株)比较| 沙保培养基 | 显色培养基 | |||||
| 白色念珠菌 | 热带念珠菌 | 克柔念珠菌 | ||||
| + | - | + | - | + | - | |
| + | 48 | 6 | 37 | 5 | 23 | 7 |
| - | 36 | 18 | 23 | 19 | 20 | 10 |
| χ2值 | 6.48 | 9.85 | 0.33 | |||
| P值 | <0.01 | <0.01 | <0.5 |
念珠菌是临床标本中最常见的酵母样真菌,引起的感染逐年增多[1]。因而对念珠菌做出快速鉴定十分重要。国际上对临床菌种鉴定技术趋向于简化程序和用最少的方法鉴定可能多的菌种,达到快速准确的目的[2]。采用念珠菌显色培养基,其最大的优点是简便快速,可直接从临床标本中分离和鉴定出白色念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌。即可在48小时作出正确判断,经生化试验确认,其符合率为90%~100%。但对念珠菌属其他种类的念珠菌菌落颜色显色不一,稳定性不好,难以作出直接判定是哪些种类念珠菌,还需要按常规方法进一步确认。
念珠菌显色培养基能缩短对白色念珠菌和热带念珠菌培养时间,同时对标本中杂菌抑制作用上明显优于沙保琼脂培养基[3]。念珠菌显色培养基还特别适合临床大便和阴道分泌物杂菌较多标本检测[4],尤其是在检测混合念珠菌感染中,能弥补传统培养基的不足。并能克服缺乏经验的实验室工作人员对标本接种划线分离不好,加之培养时间长菌落融合在一起难以判别混合菌感染的缺点。如研究中有1份标本检测出3种念珠菌,另外3份标本均检测出2种念珠菌,证实念珠菌显色培养基易于识别混合感染,并能快速、简便准确地分离鉴定临床常见念珠菌。
参考文献[1] 周贵民,谢灵.国内酵母菌感染和实验室诊断的现状及建议.中华医学检验杂志,1996,19:301-303.
[2] 李安生,吕桂霞,郭宁如,等.常见病原念珠菌鉴定的数码分类方法.中华皮肤科杂志,1994,27:339-341.
[3] Odds FC. Bernaerts R CHRuadar Candida, a New differential isolation wedinm for presumptive identification of chinicauy important candida species. J Clin Uicrob Aug, 1994,1923-1929.
[4] Houang ETS, Chu KC, Koehler AP, et al.Use of CHRUagar candida for genital specimens in the diagnostic laboratory.J Clin Patholgy, 1997,50:563-565.
