血液标本的采集和抗凝
新生儿:(6-7)×1012/L (600万-700万/uL)
临床意义:
增加或减少见血红蛋白测定. 一般情况下红细胞数与血红蛋白浓度之间 有一定的比例关系,但在部分贫血患者同时测定二者,对贫血诊断和鉴别诊 断有帮助。
红细胞比积测定
一 温氏管法(wintrobe)
原理:
红细胞比积(PCV或HT)是指红细胞在血液中所占容积的比值。 通常将定量的抗凝血液用一定的速度和时间离心沉淀后,观察压实红细胞和上层血浆体积的比值(L/L)
试剂:
干燥 EDTA-K2,3mg,分装在小瓶中,能抗凝2ml血液.
操作:
1.静脉采血2ml,立即注入抗凝瓶中,混匀.
2.用细长毛细滴管吸取混匀的抗凝血,插入红细胞比积管(温氏管,110X2.5-3mm
平底厚壁玻管)底部,然后将血液缓慢注入至刻度"10"处, 注意防止气泡产生.
3.水平离心机以3000r/min速度离心30分钟, 读取压实红细胞层柱高的毫米数, 再离心10分钟, 至红细胞不再下降为止, 乘以0.01即为每L 血液中红细胞体积L数, 以L/L单位报告结果.
参考值
男 0.42-0.49/L (42-49%)
女 0.37-0.43/L (37-43%)
附注:
1.EDTA-K2抗凝效果好, 室温48小时红细胞体积不变, 符合本试验要求.
2.上层血浆如有黄疸及溶血现象(排除种种因素)应予注明, 供临床医师参考.
临床意义
1 增高:大面积烧伤, 体外循环脱水等
2 减低:各类贫血时, 随红细胞数的减少而有程度不同的降低
二 毛细管法
原理: 同温氏法
器材: 1 微型高速离心机
2 微量毛细管
3 静脉血(EDTA-K2抗凝)
操作:
1. 用虹吸法将静脉血充进2支毛细管内
2. 将毛细玻管按号码放在专用红细胞比积高速离心机相应位置上, 关好盖 子,离心3500r/3min
3. 到时自动停机后, 直接在刻度离心盘上读出红细胞比积.
参考值: 男: 0.467±0.039, 女: 0.421±0.054
临床意义: 同温氏法
注意事项:
1 毛细管充血时不能进入气泡
2 刻度离心盘要干净, 不能有残血
3 离心盘胶垫要有弹性, 避免毛细管密封不好, 出现血液遗漏.
4 毛细管放入刻度离心槽中要按平, 以防血液遗漏.
5 如发生血液遗漏, 请清洁后重新操作.
6 注意离心机电池是否有效.
三种红细胞平均值的计算
原理 根据红细胞血红蛋白浓度, 红细胞比积, 计算红细胞平均容量, 红细胞平均血红蛋白量, 红细胞平均血红蛋白浓度, 用作贫血的形态学分类.
计算方法:
1 红细胞平均容量(mean corpuscular volume MCV): MCV是指每个红细胞平均体积, 以飞升为单位(fl).
MCV=每升血液中红细胞体积(L)X1015/每升血液红细胞浓度数(个)=fl
IL=1015fL
举例: 红细胞 3.6X1012/L, 红细胞比积0.392L/L
mCV=0.392X1015/3.6X1012=109FL
2 红细胞平均血红蛋白量(mean corpuscular hemoglobin MCH):
MCH是指每个红细胞内所含血红蛋白平均量, 以皮克(pg)为单位.
MCH=每L血液中血红蛋白浓度(g)X1012/每升血液红细胞浓度(个)=pg
1g=1012pg
举例:红细胞3.6X1012/L 血红蛋白13.6g%(136g/L)
MCH=136g/L/3.6X1012=38pg
3 红细胞平均血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration, MCHC):
mCHC是指平均每L红细胞液中所含血红蛋白浓度(g/L)
MCHC=每升血中所含血红蛋白克数(g/L)/每升血中红细胞比积(L/L)=g/L
举例: 血红蛋白136g/L, 红细胞比积0.392L/L
MCHC=136/0.392=347g/L
临床意义
正常人和各型贫血时, 红细胞平均参考值见表:
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平均值 MCH(pg) MCV(fl) MCHC(g/l)
正常 27-31 82-92 320-360
大细胞性贫血 >正常 32-50 >正常 94-160 正常
正常细胞性贫血 正常 27-31 正常 82-92 正常
单纯细胞性贫血 <正常 21-24 <正常 72-80 正常
小细胞低色素性 <正常 12-29 <正常 50-80 <正常 240-360
贫血
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附注
1. 红细胞计数, 血红蛋白测定, 必须用同一抗凝血标本测定
2. 由于以上各项数字都是间接算出来的, 因此, 其前提是红细胞数, 血红蛋白, 比积 的测定数据必须是准确的, 否则, 误差很大.
3. 应结合红细胞形态学进行贫血分析.
红细胞沉降率测定
原理
红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate ESR)是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言, 简称血沉. 在健康人血沉数值波动于一个较狭窄的范围内. 在许多病理情况下, 血沉可明显增快. 红细胞沉降是多种因素互相作用的结果. 其机理尚未完全阐明, 目前已知主要因素有血浆蛋白比例变化, 红细胞形态及数量等.
根据国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐, 以魏氏法(westergren)为标准法
试剂:
109mmol/L拘橼酸钠液:
取二份结晶水的拘橼酸钠(分子量294.12)3.21g, 用蒸馏水溶解, 稀释 至100mL. 此液在室温保存不得超过二周.
