医学检验信息网 检验医学 2007-1-28 12:50:13

关键词： 血细胞；保存；冰冻干燥 中图分类号 R318.52 R331.1^＋41 成分血的输注在发达国家已占血液输注的90%以上，因此红细胞的保存研究倍受重视。血细胞的保存通常是在4℃条件下进行，保存时间可以有效地延续至42d。特殊情况下实行深低温保存，放在－80℃冰箱或液氮(－196℃)中长期保存^［1］。这两种方法都需要低温设备，在进一步改进保存技术的研究中，冰冻干燥红细胞已成为细胞保存研究的新策略，引起了人们的关注。现将以此为主要内容的研究作一简要文献回顾。 1 血液输注和保存研究的发展史(表1)

表1 输血及血液保存研究的简史

年份	事迹
1898	首次将血液用于妇科病人
1900	发现红细胞ABO血型，并用于临床
1947	用ACD保养液保存全血21d
1957	用CPD保养液保存全血28d
1978	用CPDA-1保养液保存全血35d
1980	用MAP保存液保存全血42d
1989	冰冻干燥保存红细胞
1995	冻干红细胞再水化后进行人体实验
1996	深低温(－196℃和－80℃)保存红细胞28年［1］
1997	申报红细胞和血小板冻干专利累积15项

2 红细胞冰冻干燥保存的可行性 4℃和深低温条件下保存红细胞经长期实践获得了良好效果，已经得到确认，但冰冻再加上干燥保存之后，特别是细胞能否经受得住干燥给细胞带来的损伤，再加上早期尝试冻干保存血细胞的失败的经历，容易使人们感到困惑。Goodrich^［2］于1989年取得了突破性进展，用分子量为2.4万，180g/L浓度的PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、单糖和聚阴离子化合物等制备的填加液冻干保存红细胞，使经冻干后再水化的红细胞存活率为冻干前的72.1%，血红蛋白的回收率为66.9%，初步显示了冻干红细胞的可行性。1992年，提高了人工冻干添加液中PVP的浓度(20%)，再加1 mol浓度的蔗糖，使红细胞的活存率增加到77%，Hb的回收率为76.4%^［3，4］。1993年，用分子量4万的PVP和适宜的单糖等组成的添加液冻干保存细胞压积为10%的红细胞悬液，再水化后，反映红细胞携氧功能的P50为26～28mmHg，氧合Hb为正常红细胞的90%以上，同年Sowemimo-Coker等^［5］采集人静脉血红细胞，CPDA-1抗凝，取部分红细胞放在4℃条件下保存7d和14d，作为对照;其余用等渗葡萄糖盐水和冻干缓冲液(cryopharmpasadena,CA)混均，用冻干机(Model 115 SRC,Virtis Co.)冻干,－20℃保存7d，用磷酸盐缓冲液-葡萄糖盐水(pH 7.4,298 m0smo/kg)再水化，自动细胞洗涤机(Model 2991,Cobe)按标准洗涤程序洗涤后分成4组：第1组供测定各项指标用,第2～4组分别用ADSOL，CPDA-1和特殊添加剂混均，继续4℃保存7d，在前7d末和后7d末，测定红细胞ATP含量和反映红细胞携氧能力的2，3-DPG等指标。结果发现，保存后冻干组和4℃保存CPDA-1组的相应指标与对照组相近，甚至更好，详见表2。 表2 人红细胞冻干保存7d(－20℃)和再水化后4℃ 保存7d红细胞各项指标的变化

测定指标	冻干保存＋再 水化*	冻干＋再水化 4℃保存**	P
ATP(μmol/g Hb)	4.39±0.55 (4.02±0.45)	3.37±1.99 (3.53±0.40)	NS*
2，3-DPG（μmol/g Hb）	4.94±2.85 (3.14±2.02)	0.40±0.49 (0.70±0.73)	NS
乳酸盐(μmol/gHb)	3.9±1.4 (45.9±1.5)	17.9±13.6 (83.9±9.7)	＜0.001
MCV(fl)-细胞容量	90.8±4.4 (93.5±4.41)	90.3±4.9 (95.3±4.7)	NS ＜0.02**
MCH(pg)-平均细胞Hb	29.9±1.6 (31.0±1.8)	31.3±2.2 (31.3±1.6)	NS
渗透性脆性(mOsmol/kg)	156.7±2.07 (156.7±3.27)	155.0±5.0 (160.2±11.1)	NS
氧合Hb(%)	97.4±1.8 (99.1±0.8)	99.5±0.6 (99.8±0.3)	NS
Hb(%)	未检测	99.2±0.3 (99.1±0.8)	NS
Dimax-最大形变指数	0.64±0.02 (0.69±0.09)	0.61±0.03 (0.63 0.02)	NS ＜0.007**
相对滤过指数	0.70±0.16 (0.92±0.09)	0.86±0.08 (0.99±0.02)	＜0.02 NS**

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