医学检验信息网 检验医学 2007-1-31 12:16:42

从表3可见，同时满足完全悬浮及透光率Tc值较低的有五种条件，我们选取振频最小的即3 min，900 r/min，3 Level为悬浮最佳条件。 2.2.4 静置时间 将一块微量板分为两组，一组加B型血浆50 μl和5%B型红细胞悬液30 μl，另一组加单抗A血型试剂30 μl和5%B型红细胞悬液30 μl，经孵育、离心、悬浮，在各种静置时间中扫描，分别得二组的平均Tc值(见表4)。 表4 非凝集试验中各种静置时间所对应的Tc值变化

	静置时间(min)
0	1.5	3	4.5	6	7.5	9	10.5	12	13.5
B血浆＋B红细胞	5.15	4.63	4.74	4.48	4.53	4.48	4.72	4.88	5.20	5.58
单抗A＋B红细胞	2.40	1.82	1.92	1.80	2.59	3.77	5.10	6.52	8.10	9.78

从表4可见，反定型时的最佳静置时间为6 min左右，而正定型中为1.5 min左右。 2.2.5 扫描点数 将96孔U型微量板分为两组(各48孔)，一组加入A型血浆50 μl和5%B型红细胞悬液30 μl，另一组加入单抗B血型试剂30 μl和5%B型红细胞悬液30 μl，经孵育、离心、悬浮，最后在各种扫描点数中判读(见表5)。 表5 凝集试验中各种扫描点数对Tc值的影响情况

	扫描点数
40	32	24	16	8
A血浆＋B红细胞	60.70	60.73	53.61	21.74	2.72
单抗B＋B红细胞	82.63	82.66	80.81	43.14	9.29

从表5可见，确定40点为最佳扫描点数。 2.2.6 Cut off值 该方法建立后，我们对2 857份献血员样品进行了正反定型，然后分别对阴、阳性Tc值的分布情况进行数理统计(见表6)。 表6 11 428个阴、阳性Tc值的分布情况

阴性的分布情况	阳性的分布情况
Tc值范围(%)	n	Tc值范围(%)	n
0～5	5 606	0～5	—
5.1～9.9	108	5.1～9.9	3
10～15	—	10～15	5
15.1～25	—	15.1～25	24
25.1～35	—	25.1～35	49
35.1～45	—	35.1～45	193
45.1～	—	45.1～	5 440

从表6可见，将Cut off值确定为：阴性Tc值＜10%，10%≤可疑区域Tc值≤15%，阳性Tc值＞15%时，可疑区域和误判孔数为万分之七，即该Cut off值具有99.83%的可靠性。可疑区域和误判的标本需进一步试验。 2.3 方法的可靠性

2.3.1 重复性 取8份样品，连续进行20次反定型，对其Tc值进行统计，得阳性和阴性变异系数CV为2.90%、8.03%，均＜10%。

2.3.2 稳定性 取48份样品，每隔11天测1次，连续测3次，所得Tc值经统计，得t值为0.387，n＝62，t_(0.05)＝2.000，P＞0.05，无显著性差别。

2.3.3 准确率 通过2 857份献血员样品的正反定型，得出正反定型试验1次判读正确率为99.83%。异常主要出现在反定型中，其中3份为严重脂血，2份为血型抗体极弱。3 讨论

3.1 单克隆抗A血型试剂呈兰色，对620 nm波长的光谱有一定干扰，但影响程度不大，只要保证单克隆抗体的效价在1∶128以上即可。 3.2 脂血、溶血，以及弱的血型抗体会影响该方法反定型结果的判读，故在工作中要尽量避免脂血和溶血样品的发生。另外，还要保证5%的试剂红细胞悬液的新鲜(7天内使用)。 3.3 如果碰到ABO正反定型不符时，应该由经典方法确认，以考虑是否有亚型、弱抗体和假凝集等存在。 参考文献

1 杨春森，等.ABO反向定型微凝自动扫描法的研究.中国输血杂志，1997，10(1)：11

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