乙肝两对半定量检测及临床意义

万兵飞   《实用医技杂志》 2006 年 1 月 第 5 卷 第 1 期

  ［摘  要］ 本文通过对120例标本，分别采用IRMA、SPRIA、ELISA方法分别测定乙肝两对半和临床观察。发现由于受检抗原抗体定性结果不是阳性就是阴性，无法动态观察病情和疗效的变化，为临床所能提供的信息有限；定量检测可与血清HBVDNA荧光测定相互补充，可综合评价患者病情与药物疗效。

    ［关键词］ 乙肝两对半；定量；IRMA；ELISA；PCR

    血清乙肝标志物(俗称两对半定性测定)始于20世纪80年代中期，对乙肝疾病的诊断，病情监测，疗效观察起到了一定的作用。随着临床医学的发展，定性检测已经远远不能满足临床及患者的要求。随着检验医学的发展，乙肝两对半定量测定成为可行，大大弥补了酶标(ELISA)定性检测的不足；同时乙肝两对半的定量检测可与血清HBVDNA荧光测定相互补充，综合评价患者病情与药物疗效。

    1  资料和方法原理

    1.1  研究对象  某单位健康体检80例，临床标本40例，其中男75例，女45例，平均年龄32岁。

    1.2  方法  定量法分别为IRMA、SPRIA，试剂由北京北方生物技术研究所提供；定性法为ELISA,试剂由上海科华实业有限公司提供。

    1.3  原理  (定量法)使标记抗原和抗原与限量抗体发生竞争性结合，反应平衡后，加入分离剂，使游离抗原与抗原抗体复合物分离，测定沉淀中放射性强度；(ELISA法)包被抗原或抗体。加入标本后，再用酶标记的抗原或抗体测定抗体或抗原，使底物显色。

    1.4  操作  严格按操作说明书操作。

    2  结果与临床意义

    2.1  结果  HBsAg：(1．10±0．25)ng/ml；HBsAb：(8．2±0．71)mIU/ml；HBeAg：(0．62±0．13)ncu/ml；HBeAg：(2．10±0．51)ncu/ml；HBcAb：(2．8±0．64)ncu/ml。

    2.2  两对半定量检测极大地提高了检测的灵敏度  一般的IRMA技术检测HBsAg灵敏度可达0．5 ng/ml,而ELISA检测HBsAg达到2 ng/ml时才会阳性。

    2.2．1  急性乙肝早期  定量能及早检出HBsAg,确证HBV感染，几乎能与PreSi同时检测，在病程观察中大大缩短了“窗口期”，而酶标检测在乙肝早期往往HBsAg呈阴性。

    2.2．2  慢性乙肝  一些患者由于机体常缺乏对HBV包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，酶标检测可出现HBsAg和HBsAb均阴性的情况，而定量检测则可避免这些情况的出现，为正确判断病情提供依据。

    2.2．3  灵敏度  如病毒发生变异后，表达量较低，常规ELISA测不出抗原，而定量检测具有极高的灵敏度，可发现极有可能同时检测出HBsAg和HBsAb，血清中HBsAg含量与病人对HBsAg细胞免疫成反比关系，而肝功能改变则与此种细胞免疫成正比。定量HBsAg是反映这一关系的唯一手段。可发现低浓度的HBsAg携带者，特别是一些群体如医务工作者及病人家属等。

    3  两对半定量可动态观察疗效和病情监测

    疾病的发生、发展、疗效、预后是一个动态的变化过程，定量检测“乙肝两对半”各项标志物的浓度变化可对乙肝的病程、治疗、预后起一个动态监测的作用，能够让医生对病情疗效作出合理的解释提供依据，指导治疗。定量分析HBsAg和HBsAb浓度的变化，可以预见急性乙肝是否处于恢复期。定量分析HBeAg和HBeAb浓度的变化，可以反映病情变化和治疗效果。HBcAb浓度的高低可以反映病毒感染的状态，高浓度的HBcAb提示乙肝急性感染；低浓度一般为恢复期或既往感染。有利于对慢性肝炎活动性和非活动性的判断。可以用于慢性乙肝的分类。

    4  血清HBVDNA荧光定量

    PCR测定可以直接反映病毒复制状态具有很多临床应用价值，但不能完全反映病毒静息期肝细胞内HBV病毒状态，HBVDNA阴性并不完全代表体内HBV已被清除，结合“两对半”各项定量指标更能客观反映体内HBV病毒状态，正确判断预后及治疗。如HBVDNA阴性而HBsAg、HBeAg或HBeAb及HBcAb浓度均还较高，提示并未完全痊愈，有可能病毒再次出现复制状况，尚需密切关注。如HBVDNA阴性而HBsAg、HBeAg或HBeAb及HBcAb浓度均很低或阴性并持续一段时间，提示可能完全痊愈，预后疗效良好。

    5  HBsAb的定量测定

    能够对抗体是否真正具有“中和”HBV的免疫力作出正确评价，对乙肝的预防起到监督作用。HBsAb的含量在10 mIU/ml以上的病人在用ELISA检测就可呈HBsAb阳性结果，但并不提示机体都一定具有免疫力，而HBsAb的含量在10 mIU/ml~100 mIU/ml之间的样本，定性虽为阳性，但此时机体对HBV的免疫力较弱，甚至不能预防HBV感染，仍有感染HBV的危险。作为定量测定，根据HBsAb的含量可以判断机体对HBV的免疫状态及乙肝疫苗的免疫效果。在慢性肝病的治疗过程中病人对了解自己病情的变化最为关切，两对半定量测定乙肝标志物的浓度使病人能够对自己的病情有更清楚的了解，提高治疗信心，同时也加强了医生的信任度，有助于改善医患关系，有利于疾病的治疗。

    (涟源市人民医院，湖南 涟源 417100)