《中华检验医学杂志 2005年第1期 继续教育园地标准答案》
思 考 题
1 .心肌损伤的标志物主要有哪些?
答:临床实践中已陆续发现多种反映心肌组织损伤的标志物,包括反映心肌缺血
损伤的标志物(缺血修饰白蛋白;髓过氧化物酶; CD40 配体;等)、心肌缺血
坏死早期(发病 6 h 内)的标志物(肌红蛋白;脂肪酸结合蛋白;糖原磷酸化
酶 BB 同工酶;等)、心肌组织损伤坏死的确定标志物(如心肌肌钙蛋白)等。
而 AST 、 LD 及其同工酶和 b- 羟丁酸脱氢酶等因灵敏度和特异性都相对较差
,在心肌损伤的诊断检测中已不再应用或逐步停用。
2 .心肌肌钙蛋白的临床检测要求有哪些?
答:cTn 检测周转时间( TAT )应不超过 60 min ;应确定检测方法的健康人
群 cTn 参考范围上限(第 99 百分位值);参考范围上限值(第 99 百分位值
)的分析精密度( CV )应≤ 10% ;若达不到这一要求,应选用一个能达到检
测 CV ≤ 10% 的最低检测值作为临界值应用于临床。
3 .可用于心衰诊断时的心脏标志物主要有那些?
答:目前可用于临床心衰诊断时的心脏标志物包括 ANP 或 BNP 以及相应的无
生物活性的氨基端部分( NT-proANP 或 NT-proBNP )。
4 . C 反应蛋白在心血管疾病中主要作用有那些?
答:动脉粥样化的血栓形成除了是脂肪堆积的过程外,也是一个慢性炎症过程。
CRP 是动脉粥样硬化、血栓形成疾病的介导和标志物。 CRP 对心绞痛、急性冠
脉综合征和行经皮血管成形术患者,具有预测心肌缺血复发危险和死亡危险的作
用。
5 .心脏标志物的联合应用有什么意义?
答:心脏生物标志物合理的联合应用有利于提高心脏生物标志物临床应用的灵敏
性和特异性,有助于早期发现心脏疾病( ACS 、心衰等)的病人,有助于使病
人得到早期诊断和早期治疗,有助于监测病情,有助于估计病人的预后。
《中华检验医学杂志 2005年第2期 继续教育园地标准答案》
1.D
2.B
3.C
4.E
5.D
6.D
7.B
8.A
9.C
10.D
《中华检验医学杂志 2005年第3期 继续教育园地标准答案》
思 考 题
1 . 检测血小板数量和质量常用哪些试验?检测凝血和纤溶有哪些分子标
志物?
( 1 )检测血小板数量和质量试验:血小板计数( Plt )、血小板抗体测
定( PAIg )、血小板膜糖蛋白测定( GP Ⅰ b 、 GP Ⅱ b/ Ⅲ a )、血小
板粘附试验( PAdT )、血小板聚集试验( PAgT )、β - 血小板球蛋白测定
(β -TG )、血小板第 4 因子测定( PF4 )、血小板膜 P- 选择素( GMP-
140 )测定、血栓烷 B2 测定( TXB2 )、 6- 酮 -PGF1 α测定( 6-keto-
PGF1 α)和血块收缩试验( CRT )等。
( 2 )反映凝血系统活化的分子标志物:凝血酶原片段 1+2 、纤维蛋白肽
A ( FPA )、血栓前体蛋白( TpP )、组织因子( TF )、组织因子途径抑
制物 (TFPI) 、凝血酶 - 抗凝血酶复合物 (TAT) 等。反映纤溶系统活化的分
子标志物:凝血酶激活的纤溶抑制物( TAFI) 、纤溶酶 - 抗纤溶酶复合物(
PAP )、谷氨酸型纤溶酶(原)( Glu- PL 或 Glu-Plg )、α 2 - 抗纤溶
酶(α 2 -AP )、组织纤溶酶原激活物( t-PA )及其抑制物( PAI-1 )、
纤维蛋白(原)降解产物( FDP )和 D- 二聚体( D-D )等。
《中华检验医学杂志 2005年第4期 继续教育园地标准答案》
思 考 题
1 .一期止血缺陷和二期止血缺陷分别用哪些试验作为筛选试验?检测的结果
如何分析?
( 1) 一期止血缺陷的 筛选试验 ①出血时间( BT); ②血小板计数(
PLT)。
结果分析:① BT 和 BPC 都正常:除正常人外,多数是由于单纯血管壁通透性
和 ( 或 ) 脆性增加所致的血管性紫癜。临床上常见于过敏性紫癜、遗传性出血
性毛细血管扩张症、单纯性紫癜、机械性紫癜、老年性紫癜、类固醇性紫癜、
Ehlers-Danlos 综合征以及异常蛋白血症所致血管性紫癜等。② BT 延长伴
BPC 减少:多数是由于血小板数量减少所致的血小板减少性紫癜。临床上多分为
原发性和继发性两种,后者常见于再生障碍性贫血、急性白血病、放疗和化疗之
后、弥散性血管内凝血 (DIC) 、脾功能亢进、血栓性血小板减少性紫癜 - 溶
血尿毒症综合征 (TTP-HUS) 等。③ BT 延长伴 BPC 增多:多数是由于血小板
数量增多所引起的血小板增多症。临床上多分为原发性和继发性两种,后者常见
于慢性粒细胞白血病 、 真性红细胞增多症 、 骨髓纤维化以及严重感染 、 急
性溶血 、 严重创伤和广泛性大手术等。④ BT 延长伴 BPC 正常 / 减少:多
数是由于血小板功能异常或某些凝血因子缺陷所引起的出血性疾病。血小板功能
异常多见于遗传性和获得性血小板无力症 、 致密颗粒缺陷症、 α 颗粒缺陷症
和血小板第 3 因子缺陷症等;某些凝血因子缺陷症主要是血管性血友病( vWD
)、 低 ( 无 ) 纤维蛋白原血症和异常纤维蛋白原血症等。
( 2 )二期止血缺陷的 筛选试验 ①活化部分凝血活酶时间 (APTT);②血浆
凝血酶原时间(PT) 。
结果分析: ① APTT 和 PT 都正常:除正常人外,仅见于遗传性和获得性因子
XIII 缺乏症。获得性者常由严重肝脏疾病、恶性肿瘤、恶性淋巴瘤、急性白血
病、抗因子 XIII 抗体、自身免疫性溶血性贫血和恶性贫血等引起。② APTT
延长伴 PT 正常:多数是由于内源性凝血途径缺陷所引起的出血病。如血友病 A
、血友病 B 、因子 XI 缺陷症;血循环中有抗因子 VIII 、抗因子 IX 或抗因
子 XI 抗体存在; DIC 时可见因子 VIII 、 IX 、 XI 减低,肝脏疾病时可
见因子 IX 、 XI 减少,口服抗凝剂时因子 IX 减低、血管性血友病( vWD )
等。③ APTT 正常伴 PT 延长:多数是由于外源性凝血途径缺陷所引起的出血
病。如遗传性和获得性因子 VII 缺陷症,获得性者常见于肝脏疾病、 DIC 、
血循环中有抗因子 VII 抗体存在和口服抗凝剂等。④ APTT 和 PT 都延长:多
数是由于共同途径凝血缺陷所引起的出血病。如遗传性和获得性因子 X 、 V 、
凝血酶原(因子 II )和纤维蛋白原(因子 I )缺陷症,获得性者主要见于肝
脏疾病和 DIC ,口服抗凝剂时可有因子 X 和凝血酶原减低;此外,血循环中
有抗因子 X 、抗因子 V 和抗因子 II 抗体存在时,它们也相应地延长。临床
应用肝素治疗时, APTT 和 PT 也都会延长。
2 .诊断 DIC 用哪些常用试验?如何用记分法来诊断 DIC ?
( 1 )诊断 DIC 常用试验 Plt 、 PT 、 APTT 、 TT 、 Fg 、 AT 、 FDP
、 DD 、破碎红细胞等。
( 2 )记分法诊断 DIC 标准 见下表。
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失代偿性(显性) DIC 诊断标准 |
代偿性(非显性) DIC 诊断标准 | |
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原发疾病 存在 |
2 分 |
2 分 | |
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原发疾病 不存在 |
0 分 |
0 分 | |
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plt (× 109/L ) |
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>100 0 分 |
>100 0 分 | ||
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<100 1 分 |
<100 1 分 | |
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<50 2 分 |
动态观察:↑ -1 分,稳定 0 分,↓ +1 分 | ||
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SFMC/FDP |
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不↑ 0 分 |
不↑ 0 分 | ||
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中度↑ 2 分 |
↑ 1 分 | ||
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高度↑ 3 分 |
动态观察: ↓ -1 分,稳定 0 分,↑ +1 分 | ||
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PT(s) |
失代偿性(显性) DIC 诊断标准 |
代偿性(非显性) DIC 诊断标准 | |
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未延长或延长 <3 0 分 |
未延长或延长 <3 0 分 | ||
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延长 3~6 1 分 |
延长 >3 1 分 | ||
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延长 >6 2 分 |
动态观察: 缩短 -1 分,稳定 0 分,延长 +1 分 | ||
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Fg(g/L) |
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≥ 1.0 0 分 |
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<1.0 1 分 |
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特殊检查: AT :正常 -1 分,↓ 1 分; | |
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PC :正常 -1 分,↓ 1 分; | |
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TAT :正常 -1 分,↓ 1 分; | |
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PAP :正常 -1 分,↓ 1 分; | |
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TAFI :正常 -1 分,↓ 1 分。 | |
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判断标准: |
积分 >5 分者 , 符合显性 DIC 诊断,每天重复测定并记分,以作动态观察 |
积分≥ 2~<5 分,提示非显性 DIC ,每天重复测定并记分,以作动态观察。 | |
3 . 应用普通肝素及口服抗凝剂时,分别用哪些试验作为监测指标?这
些检测指标维持在何等水平为宜?
( 1 )应用普通肝素( uFH ):首选 APTT 作为监测指标,使 APTT 较正常
对照值延长 1.5 ~ 2.5 倍为宜,其次选用 uFH 血浆浓度测定,使其维持在
0.2 ~ 0.4IU/mL 。但在体外循环应用 uFH 抗凝时,需选用活化的凝血时间(
ACT ),参考值为 60 ~ 120 秒,使其维持在 380 ~ 420 秒为宜。
( 2 )口服抗凝剂的监测:首选 WHO 推荐用凝血酶原时间( PT )国际正常
化比率( international normalized ratio , INR ),一般中国人维持在
2.0 ~ 2.5 之间为宜。
《中华检验医学杂志 2005年第5期 继续教育园地标准答案》
思 考 题
1. MALDI-TOF-MS技术的主要原理是什么?
答: MALDI-TOF-MS的中心技术就是依据蛋白质的质量电荷之比(m/z)的不同来
进行检测。将待检的蛋白质混合物与化学基质(matrix)混合,然后将之滴于特
殊的化学介质的表面,使其进行挥发,样品便会整合于格状晶体中。然后将激光
作用于样品混合物, MALDI 采用短激光脉冲 (1-10ns) ,激光波长通常为
337nm 和 10.6mm ,在激光作用下,基 质 对激光有较强的吸收而被激发、蒸
发,而样品分子对激光仅有弱吸收,基体将样品带入气相。同时样品与激发态的
基 质 间发生酸碱反应,产生离子。 这些形成气态的多肽离子直接进入飞行时
间质谱分析仪,分析仪测量多肽离子由分析仪的一端飞抵另一端探测器所需要的
时间。由于多肽分子常常吸收单一光子,故多肽离子带单一电荷,所以蛋白质在
这之中飞行时间的长短仅仅和质量电荷之比成反比,即 m/z越高,飞行时间越短
,反之亦然。 最后,探测器得到的蛋白质m/z可同数据库进行比较,以鉴定该蛋
白质。
2.SELDI-TOF-MS与MALDI-TOF-MS比较,优点在哪里?
答: SELDI-TOF-MS与MALDI-TOF-MS的比较的优点在于,蛋白质先和芯片表面
物质结合,再加上基质,因此获得的图谱更单一,受到基质等物质的影响会比较
小,并且重复性好。另外,SELDI-TOF-MS技术分析的样品可以是未经纯化的标
本,如一些体液(血液、尿液、精液、关节腔液等等),无需液相色谱或气相色
谱预先纯化蛋白质或是多肽,因此可用于分析复杂的生物样品的检测,如临床标
本。
3.SELDI-TOF-MS与2-DE比较,优点是什么?
答: SELDI-TOF-MS可以检测疏水蛋白,对于低丰度的蛋白质的检出效率也比较
高,灵敏度高 ,结果无需染色,省时,高通量以及自动化等优点,它 克服了
2-DE的局限性,成为了2-DE技术的有力竞争者。
4.SELDI-TOF-MS的优势?
答: SELDI-TOF-MS在蛋白质检测和鉴定方面确实有着独到之处。它的主要优势
体现在 :( 1 )可以直接用 未经纯化的 样品分析,如血液、尿液、关节腔液
等。( 2 )样品用量少 ( 最少 0.5-5 μl) ,灵敏度高,有利于检出低丰度
、小分子量的蛋白质。( 3 )高通量,便于自动化,可以同时快速发现多个生
物标志物。( 4 )速度快。( 5 )可测定疏水蛋白质特别是膜蛋白质等。
5 .飞行时间质谱技术在应用方面有哪些探索?
答:飞行时间质谱技术在蛋白质及多肽的研究中可应用范围比较广,从基础研究
到临床应用,在实验室中有着广阔的前景。如比较蛋白质组的表达差异;确定抗
原决定簇 /纯化蛋白;鉴定蛋白质功能;研究蛋白质与蛋白质之间的相互作用,
如获某已知蛋白(抗体、受体、酶),即可用蛋白质芯片技术获得其靶蛋白(抗
原、配体、底物);与DNA或RNA结合蛋白的研究;蛋白磷酸化和糖基化的研究;
药物研究开发以及生物药的药代动力学研究等等.
《中华检验医学杂志 2005年第6期 继续教育园地标准答案》
思 考 题
1 .什么是单克隆抗体及其特点?
答:是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体,称为单克隆抗体
。它的特点是特异性针对单一抗原决定簇,理化性状高度均一、生物活性单一,
与抗原结合的特异性强,便于人为处理和质量控制,并且来源容易。这些优点使
它一问世便受到高度重视,并广泛应用于生物学和医学研究领域。
2.单克隆抗体用于医学诊断构建了那些检测方法?
(1) 酶联免疫吸附试验
(2) 荧光免疫试验
(3) 凝集试验
(4) 胶体金技术
(5) 免疫印迹试验
(6) 放射免疫测定
(7) 电化学发光检测
(8) 流式细胞术
3. 什么是基因工程抗体?
答:是通过 PCR 技术获得抗体基因或抗体基因片段,与适当载体重组后引入不
同表达系统所产生的抗体,被广泛应用于疾病的临床临床诊断、预防、治疗及基
础理论研究等领域。
4. 什么是单链抗体?
答:单链抗体是在 DNA 水平上将轻、重链可变区基因用一段适当的寡核苷酸(
Linker, 接头)连接起来,使之在适当的生物体中表达成为一条单一的肽链,
称为单链抗体。
5. 什么是双特异性抗体?
答:它有两个抗原结合位点的基因工程抗体,具有不同的特异性,可同时结合两
个不同的抗原或抗原决定簇,即结构上以 、功能上单价。它是一种杂交分子,
两条 H 链与两条 L 链之间结构不同,两条 Fab 片段也不同。
中华检验医学杂志 2005年第7期 继续教育园地标准答案》
1.DNA 模板、 DNA 多聚酶、引物 ( 寡脱氧核糖核酸链 ) 、 Mg 2+ 、底物 [
脱氧核糖核酸( dNTP ) ] 及缓冲液。
2. 琼脂糖凝胶电泳、 Sanger 测序、单链结构多态性、变性梯度凝胶电泳、
Southern 杂交、等位基因特异性寡核苷酸、限制性片段长度多态性、酶切片段
长度多态性、等位基因特异性寡核苷酸、小测序等。
3.DNA 生物传感器与 DNA ****的区别在于 DNA 生物传感器是在识别元件的表
面上有一生物活性层,它可把生物识别事件(如杂交)转为信号,而 DNA ****
表面必须在杂交和冲洗后,通过扫描或照相分析,才能得到完整的杂交模式。
4.b
5. 不能,因为 PCR 具有平台效应。
《中华检验医学杂志 2005年第8期 继续教育园地标准答案》
1.AB
2.D
3.BC
4.B