胆碱酯酶两种方法测定比较
[摘 要]目的:研究胆碱酯酶测定两种方法对检测有机磷农药中毒的影响。方法:分别用丁酰胆碱(以下称丁法)和乙酰胆碱(以下称乙法)作底物,检测丁酰胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶。并对300例结果进行了分析,结果:异常率(少于参考值)丁法为2.3%;乙法为1.6%,经χ2检验,两者无明显差异。结论:两种方法均可作为有机磷农药中毒指标。
[关键词] 有机磷中毒;乙酰胆碱酯酶;丁酰胆碱酯酶
有机磷中毒在基层比较常见,有机磷化合物是胆碱酯酶的强烈抑制剂,使其活性降低,故临床检测胆碱酯酶是诊断有机磷中毒的重要手段,现用两种不同方法同时测定300例标本,对结果进行了比较分析。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 随机抽取300名检查者血液,作疑为有机磷中毒调查。
1.1.2 试剂 丁法为英国RANDOX试剂盒,质控品为英国RANDOX生化质控品;乙法为自配试剂(三氯化铁法)。
1.1.3 仪器 日立7020型全自动生化分析仪,每天进行室内质控,质量稳定;721型分光光度计。
1.2 方法 分别用血清和抗凝全血检测胆碱酯酶,丁法为连续监测法,乙法为三氯化铁比色法。具体操作见操作规程。
2 结果
丁法受检的300例中有7例低于参考值;乙法受检的300例中有5例低于参考值;两者经卡方检验χ2=0.3562<χ2(0.05)故P>0.05两者差异无显著性,同样适用于胆碱酯酶检测。
3 讨论
人和动物的胆碱酯酶有两类。一类是真胆碱酯酶(ACHE)即乙酰胆碱酯酶,分布于红细胞及脑灰质等中,对乙酰胆碱亲和力大,对丁酰胆碱亲和力小,用全血测定;另一类是拟胆碱酯酶(PCHE)又叫丁酰胆碱酯酶,分布于肝、脑白质及血清等中,对丁酰胆碱亲和力大,对乙酰胆碱亲和力小,用血清测定。两者均可催化酰基胆碱水解。生物碱新斯的明及毒扁豆碱的分子与胆碱相似,是两类胆碱酯酶的竞争性抑制剂。其他如各种叔胺及吩噻嗪,杨橼酸盐、氯化物及硼酸盐、吗啡、磷酸盐特别是有机磷毒剂是其强抑制剂[2],故用乙法或丁法两者测定胆碱酯酶都可以反映有机磷农药中毒情况,且与胆碱酯酶活性成员相关,中毒越严重,其活性越低。
丁、乙两法测定胆碱酯酶关键是选好合适底物,即选择亲和力大,特异性强,易被该酶催化水解的底物,包括其他注意事项。
在以往测定中,据临床反映,丁酰胆碱酯酶降低程度往往比病情重得多,即病情似乎看不出有明显有机磷中毒状,而胆碱酯酶测得结果却很低,临床医师认为与病情不符,其实复查结果仍然很低,这要考虑其他影响因素诸如药物、肝脏功能、抑制剂等等,另外,丁酰胆碱酯酶主要存在于肝、血清中,可能易被有机磷化合物抑制,有待进一步证明,也可能与选择底物有关。
参考文献:
[1] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].第2版.南京:东南大学出版社,1997:224225.
[2] 朱忠勇.实用医学检验学[M].北京:人民军医出版社,1992:365368.
(仙居县第二人民医院,浙江 仙居 317300)
