骨髓活检组织制片方法的改进
［关键词］ 骨髓活检组织；脱钙剂；固定剂
骨髓活检组织在病理切片中常出现染色模糊和细胞固缩的现象，对骨髓组织造血细胞的辨认，造成一定的困难，甚至导致误诊或漏诊，实践中我们发现除了与染色方法有关外，主要与脱钙剂／固定剂关系密切。经过反复实验，我们采用骨髓活检标本经Bouin固定液固定，甲酸混合液脱钙，甲醛冰醋酸酒精混合液(简称F.A.A混合液)再固定的方法，获得了良好的制片效果，配合使用微波技术，明显缩短了脱钙时间，现介绍如下。
1 材料与方法
1.1 材料 收集我院血液内科骨髓活检标本20例。微波仪为ZDⅢb(上海中达医学应用研究所生产)，功率为600 W~1 320 W。
1.2 Bouin固定液 固定液配方：饱和苦味酸水溶液75 ml，40％甲醛20 ml,冰醋酸5 ml。
1.3 脱钙剂(甲酸混合液) 脱钙剂配方：甲酸50 ml；甲醛10 ml，蒸馏水40 ml。
1.4 固定剂(F.A.A混合液) 固定剂配方：甲醛20 ml，95％酒精75 ml，冰醋酸5 ml。
1.5 组织处理程序 骨髓活检组织放入Bouin液中仅需固定30 min，再入甲酸混合液，于玻璃或塑料缸内，用微波仪2档15 s，流水冲洗10 min~15 min。入F.A.A混合液固定1 h~2 h。常规脱水，透明、浸蜡、包埋、制片。
2 结果
经上述方法固定、脱钙，固定后的骨髓组织经常规组织学技术处理，用一次性刀片切片，切片薄，无刀痕、皱褶。HE染色，幼稚粒系、红系、淋巴及巨核细胞染色均较好，能清楚的显示嗜中性颗粒，核浆染色对比度好，胞浆较完整。Giemsa染色也能较好地显示胞核胞浆的结构。
3 讨论
Bouin固定液穿透力迅速而均匀，引起组织与细胞的收缩较轻，固定后组织着色鲜艳［1］脱钙液与常用的盐酸和硝酸相比，甲酸对骨髓组织损害小，加入甲醛还可以适度保护组织免受酸的损害［２］。针对甲酸脱钙时间较长，采用微波辐射可以加速组织内分子的高速运动，增加了细胞的渗透性和溶剂分子的穿透力［3］，使脱钙时间明显缩短。F.A.A固定液中的乙醇兼有脱水作用，醋酸作用于核蛋白［４］，保证了蛋白的固定，使核蛋白的结构清晰可辨。
参考文献：
［1］ 浦权，杨梅如.血液病骨髓诊断病理学［M］.第1版.北京：科学出版社.2002：8.
［2］ 孔庆雷.组织病理学与组织化学技术手册［M］.第1版.北京：科学出版社，1982：64.
［3］ 倪灿荣，龚志锦.微波技术在病理工作中的应用［J］.临床与实验病理学杂志，1992，8(1)：66.
［4］ 白坛.病理学技术［M］.第1版.北京：人民卫生山版社.2000：68.
(十堰市太和医院，湖北 十堰 442000)
