不同剂量阿斯匹林抑制血小板聚集功能时效探讨
（摘要）目的:探讨阿斯匹林常用剂量下，血小板聚集的变化规律及诱导剂的选择。方法30名经体检健康的自愿者，随机分为3组。第一组一次服用200mg阿期匹林,第二组初服100mg阿斯匹林后每日50mg追加量,连服7天。第三组口服50mg阿斯匹林。各组分别在不同时间进行采样，样本用花生四烯酸、瑞斯托霉素、胶原、二磷酸腺苷（ADP）四种诱导剂进行血小板聚集实验。结果:第一组停药第7天，血小板聚集率恢复到服药前水平。花生四烯酸诱导的血小板聚集实验对口服阿斯匹林最为敏感。第二组，血小板聚集率在服药的7天及停药后9天内与用药前差异有非常显著意义(P<0.01),在第十天差异有显著意义(P>0.05),第十一天恢复至服药前水平。以上两组,花生四烯酸诱导的血小板聚集率的变化比其他诱导剂诱导的变化明显。第三组3天内血小板功能仍受明显抑制。 结论:首服剂量越大,维持服药的时间越长,血小板聚集功能恢复所需时间越长。花生四烯酸诱导的血小板聚集实验是监测阿斯匹林剂量比较理想的实验。 阿斯匹林是常用的抗血栓药物之一。然而究竟服用多大剂量可以抑制血小板功能，停药多长时间或使其功能恢复文献报道甚少。作者观察了服用不同剂量组，用药过程及停药后不同时间各种诱导剂致使血小板聚集功能的变化，旨在使临床合理分析血小板聚集功能实验结果并为用药提供实验依据。 材料与方法 1. 样本来源：30名经体检健康的自愿者，随机分为3组。第一组;一次服用200mg阿斯匹林，服药后间隔24小时取样，连续取样7天。第二组；初服100mg阿斯大林匹林后每日50mg追期量，连服7天。此组病人从开始服药后第4天和第7天取样。停药以后，于第6、8、10、11天取样。第三组；男女各5例，口服50mg阿斯匹林后于2、24、48、72、小时取样，以上各组病人服药前均取样作为对照。
2. 仪器与试剂；
（1）仪器；血小板聚集仪、Coulter—RI血液分析仪。（2）诱导剂：花生四烯酸（AA）、瑞斯托霉素（RIS）、胶原（COL）为美国Piopool公司产品，二磷酸腺苷（ADP）为上海生物化学试剂厂产品。
3. 检测：血小板聚集：取3.8枸橼酸钠抗凝血（1：9），800r/min，离心5分钟提取富含血小板血浆（PRP），再3500r/min离心10分钟提取乏血小板血浆（PPP），用血液分析仪计数血小板，用乏血小板血浆调整PRP至250×10---9/L，用PPP作空白，进行不同诱导剂的血小板聚集试验。
结果与统计
所有数据计算出平均值和标准差，并各组间进行完全随机方差检验，服药后外理组与服药前进行均数比较（DUNNETT检验）。
1、1次服用200毫克阿期匹林后各时间血小板聚集率变化见表1。 从表1可以看出，花生四烯酸诱导的血小板聚集对阿斯匹林最为敏感，直到停药第7天，血小板聚集率才恢复正常，瑞斯托霉素诱导血小板聚集不受阿斯匹林影响。而ADP和胶原诱导的聚集分别在停药的第3和第5天恢复到用药前水平。
表1 口服200mg阿斯匹林给药前后血小板聚集率（%）均值变化
时间 AA RIS COL ADP
给药前 78.4 88.4 59.8 42.3
给药后
1d 9.6 83.6 42.5 31.2
2d 16.3 85.5 46.6 38.7
3d 18.3 86.0 49.2 42.5
4d 20.2 87.0 52.2 47.5
5d 36.5 86.1 58.3 47.9
6d 43.4 81.2 61.5 50.0
7d 69.6 82.4 57.8 46.6
表2 连续口服50mg阿斯匹林给药前后血小板聚集功能变化（%）
时间 AA RIS COL ADP
给药前 68.5 84.2 56.0 40.0
给药时间
4d 8.3 86.5 40.5 26.5
7d 16.0 84.0 42.0 30.2
停药后
6d 20.2 86.2 59.8 38.1
8d 24.3 82.6 61.2 40.2
9d 30.7 84.7 60.5 42.8
10d 43.2 83.5 82.0 39.8
11d 68.3 85.7 60.9 39.6
表3 一次服用50mg阿斯匹林，男女两组血小板聚集率的变化
性别 给药前 停药后
2h 24h 48h 72h
男 62.5 29.0(46%) 12.2(20%) 14.3(23%) 24.8(40%)
女 48.0 22.3(46%) 10.5(24%) 24.4(47%) 37.1(77%)
2、第1天口服100mg，后连续每日口服50mg7天组结果见表2。花生四烯酸诱导的聚集率在服药的7天及停药后9天内与用药前差异有非常显著意义(P<0.01)，在第10天差异有显著意义(P<0.05)，第11天恢复至正常，ADP和胶原在停药第6天恢复正常。瑞斯托霉素诱导的聚集终维持在正常水平。
3、第三组病人的结果见表3。结果显示，10例正常人一次服用50mg后，3天内花生四烯酸诱导血小板聚集率变化，可见3天内血小板功能仍受明显抑制，但较服用200mg者轻。前者停药3天时，男女聚集充分别为用药前的40%（24.8/62.5）和77.2%（37.1/48），而后者仅为23%（18.3/78.4）。
讨论
血栓性疾病是临床各科常见的疾病。血小板在血栓形成中起着重要的作用，人们希望应用其具有抗血小板作用的药物来防治血栓栓塞性疾病。 阿斯匹林是环氧化酶抑制剂，能使该酶第530位的丝氨酸残基乙酰化，破坏了酶活性中心从而阻断了血栓烷的合成。文献报道以一次服用325mg阿斯匹林就可以抑制血小板大约90%的环氧化酶，因为，药物抑制是不可逆的，一次用药即可使血小板的功能障碍持续一段时间，直至骨髓巨核细胞产生一定数量新的血小板取代已受抑制的外周血小板，其聚集功能才能得到恢复。 临床工作中究竟应用多少剂量阿斯匹林可起防治效果又减少副作用，目前各家医院报道不一，尤其是停药后多长时间血小板聚集力即可恢复使口服此类药物病人因其它疾病需要手术时不致产生出血现象，迄今尚未有系统的实验数据或临床报道。为此，笔者进行了前述的实验探讨。
1. 从结果可以看出3种方式口服阿斯匹林均可明显抑制血小板的聚集功能，但作用强度与持续时效不同。一次口服200mg停药后第7天才能使花生四烯酸诱导聚集功能恢复，一次口服50mg，停药3天内血小板聚集受到抑制。但其受抑强度明显低于前者（第3天时分别相当于给药的聚集率分别是40%和70%）。说明抑制时间与服药剂量有关。对比表1和表2可以看出连续给药后停药较一次口服后停药更能持续对血小板的抑制作用。这可能是阿斯匹林抑制血小板功能是不可逆的，只有新生血小板达到一定比例才能使血小板聚集。由于连续用药较一次用药能更多地抑制血小板聚集，因此停药后功能恢复较慢。从这些结果可以认为：（1）血小板功能的恢复与用药剂量及用药方法相关，一次服用200mg停药后第1、3天，男女聚集率相当服药前的40%和77%。（2）连续口服与一次服药同样剂量停药后手术的病人有较重要的参考价值。
2. 表1、2显示了不同诱导剂对同一标本的血小板作用后，聚集率明显不同。这与血小板的聚集原理有关。前已述及阿斯匹林可抑制环氧化酶，使花生四烯酸代谢障碍，阻断对血小板聚集有很大诱导作用的TXA2的产生，因此，血小板聚集受到抑制持续时间长。由于花生四烯酸代谢的障碍，使血小板内钙流受阻，进而影响了ADP和胶原诱导的聚集，但其持续时间短，瑞斯托霉素的聚集与TXA2及血小板钙浓度无关。服用阿斯匹林不引起其诱导的聚集变化。临床工作中应根据不同的诊断目的，选择不同的诱导剂进行血小板聚集实验。在抗血栓治疗中服用阿斯匹林后观察疗效，首先，应选用花生四烯酸作聚集剂观察血小板聚集率，但由于血小板膜上存在可以导致聚集的多种受体，其功能受抑程度与花生四烯酸作聚集剂观察血小板聚集率，但由于血小板膜上存在可以导致聚集的多种受体，其功能受抑程度与花生四烯酸诱导结果度不同步，因而在分析药作用时应兼顾多项指标变化（至少要考虑花生四烯酸和ADP两项诱导聚集率）。反之，在分析停药后，血小板功能恢复（特别是需要手术时）更要注意综合分析，切不可只观察ADP的诱导变化，而勿视花生四烯酸诱导的血小板聚集率这一指标。
3. 表3显示男女对阿斯匹林反应不同，特别是女性的反应持续程度明显有别于男性，此点对临床用药或疗后观察也许内有一定的参考价值。
