医学检验信息网 检验医学 2007-1-19 16:41:32

孙铁，孙惠平 2006-5-18 16:04:55 《实用医技杂志》 2006年2月 第5卷 第4期 关键词：FQ－DNA－PCR（荧光定量PCR技术）

［关键词］ FQ－DNA－PCR（荧光定量PCR技术）；ELISA；乙肝两对半（乙肝系列）

［摘  要］ 通过用两种方法对HBsAg阳性和阴性标本结果检测和对比，使临床对HBsAg阴性患者的重视，并在确定乙型肝炎时应以乙肝两对半为参考，其传染性及疗效可参考乙肝病毒定量。

过去对乙型肝炎以HBsAg阳性为标志。随着检查方法的不断改进和发展，乙肝两对半的应用，抗HBc（抗HBcIgM和抗HBcIgG）已成为乙型肝炎的重要标志。而PCR技术的应用，对乙型肝炎DNA的定量检测，成为乙型肝炎病毒传染性和疗效的观察窗口。为此，我们采用FQ－DNA－PCR荧光定量技术对294例阳性标本和用ELISA酶免技术对987例HBsAg阴性标本进行检测对比，结果如下。

1  标本来源

标本来自门诊、住院患者HBsAg阳性294例和HBsAg阴性987例。

2  方法

2．1  PCR  采用FQ－DNA－PCR（荧光定量PCR技术）。

2．2  ELISA（酶免法）

3  设备及试剂

3．1  PCR设备 

扩增仪：德国480型扩大增仪；检测仪：DA620型微量荧光检测仪；酶标仪：美国百特－450型酶标仪。

3．2  试剂 

PCR试剂由广州中山达安公司提供经国家批准的试剂HBV阳性标准品，HBV阴性对照及临界阳性标准品。酶免试剂上海科华。

4  结果

4．1  PCR法 

阳性率67％（197人），阴性率33％（97人）；阳性标本中：(1.0～3.8)×105拷贝占28.43％（56人）；(4.0～9.2)×105拷贝占11.68％（23人）；(1.0～3.8)×106拷贝占13.71％（27人）；(4.0～8.2)×106拷贝占7.11％（14人）；(1.0～3.8)×107拷贝占4.57％（9人）；（4.0～9.2）×107拷贝占10.15％（20人）；(1.0～3.8)×108拷贝占5.08％（10人）；(4.0～9.2)×108拷贝占12.18％（24人）；(1.0～3.8)×109拷贝占3.55％（7人）；(4.0～9.2)×109拷贝占3.55％（7人）
4．2  ELISA结果  抗HBC（抗HBcIgM及抗HBcIgG）阳性率11.8％，见表1。表1  ELISA结果（略）

5  讨论

拷贝数与病毒含量基本成一一对应关系。100拷贝＝1×1015g。不是所有HBsAg阳性都有病毒复制和感染性。对疑为乙型肝炎患者应以乙肝系列（两对半）检查为主。抗－HBcIgM是乙型肝炎的早期感染指标，经过短暂期后出现抗－HBcIgG。若单纯的HBeAg阳性应排除丙型肝炎。乙型肝炎患者进行PCR病毒定量检查为临床诊断及疗效观察提供了良好的观察窗口，疗效直观。

参考文献：

［1］周琳.HBsAg阴性两对半结果分析［J］.国外医学，2002，23（增）：105.

(1.铜川矿务局中心医院，陕西 铜川 727000；2.西安市结核病医院，陕西 西安 710061)

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